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5種類(lèi)胡蘿卜素天然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的高效液相色譜的分離測(cè)定

閱讀:3863      發(fā)布時(shí)間:2020-11-11
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背景

 

葉黃素、玉米黃質(zhì)、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素是天然植物性食品中Z為常見(jiàn)的5種類(lèi)胡蘿卜素類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),具有維生素A原活性、抗氧化、參與細(xì)胞傳遞、免疫功能調(diào)節(jié)與促進(jìn)、保護(hù)皮膚免于紫外線(xiàn)傷害和抑制黃褐斑生成等諸多生理保健功效。

 

但這5種類(lèi)胡蘿卜素類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的液相色譜同時(shí)分離測(cè)定一直比較困難,原因是這5種類(lèi)胡蘿卜素類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的極性差異比較大,葉黃素和玉米黃質(zhì)分子結(jié)構(gòu)中有兩個(gè)羥基,極性較強(qiáng),在反相液相色譜柱(如C18等)上的保留力較弱,而α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素是烴類(lèi)物質(zhì),僅由碳和氫兩種原子構(gòu)成,無(wú)任何極性官能基團(tuán),極性極弱,在反相液相色譜柱(如C18等)上的保留力*;另外,更為重要是葉黃素和玉米黃質(zhì)之間,以及α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素之間,兩兩互為同分異構(gòu)體,相互間僅是一個(gè)碳-碳雙鍵的位置差異,液相分離難度大(分子結(jié)構(gòu)詳見(jiàn)附錄A,特征吸收光譜圖詳見(jiàn)附錄B)。

本應(yīng)用案例采用月旭科技公司生產(chǎn)的C30反相高效液相色譜柱、兩元梯度洗脫,實(shí)現(xiàn)了單次高效液相色譜檢測(cè)對(duì)葉黃素、玉米黃質(zhì)、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素這5種類(lèi)胡蘿卜素類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分離檢測(cè),且單次高效液相色譜檢測(cè)費(fèi)時(shí)為35分鐘。

 

高效液相色譜檢測(cè)條件

 

1 儀器設(shè)備

Welch 高效液相色譜儀,WiSys5000,配備二級(jí)管陣列檢測(cè)器;

2 液相色譜柱

分析柱:Ultimate XB-C30色譜柱,4.6mm×250mm, 5μm;

保護(hù)柱:Ultimate XB-C30,4.6mm×10mm, 5μm;

3 流動(dòng)相

A相:甲醇:乙腈=1:1;B相:乙酸乙酯;

4 梯度洗脫程序

 

5 流速

1.0mL/min;

6 檢測(cè)波長(zhǎng)

476nm;

7 柱溫

30℃;

8 進(jìn)樣體積

20μL。

 

高效液相分離色譜圖

 

 

從高效液相檢測(cè)的色譜圖看,不僅單次檢測(cè),35分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)同時(shí)分離檢測(cè)葉黃素、玉米黃質(zhì)、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素這5種類(lèi)胡蘿卜素類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而且互為同分異構(gòu)體的葉黃素和玉米黃質(zhì)之間,以及α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素之間,都基本實(shí)現(xiàn)了基線(xiàn)分離。

 

相關(guān)色譜耗材 

 

附錄A:5種類(lèi)胡蘿卜素天然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)

 

 

 

附錄A:5種類(lèi)胡蘿卜素天然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)

 

 

 

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