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關(guān)于高效液相色譜儀在操作時遇到的技術(shù)問題解答
常見問題整理如下
1、高效液相色譜儀是如何實(shí)現(xiàn)高效、快速、靈敏這些特點(diǎn)的?
解：氣相色譜理論和技術(shù)上的成就為液相色譜的發(fā)展創(chuàng)造條件，從它的高效、高速和高靈敏渡得到啟發(fā)，采用5一10四微粒出定相以提高柱效，采用高壓泵加快液體流動相的流速;設(shè)計(jì)高靈敏度、死體積小的紫外、熒光等檢測器，提高檢測靈敏度，克服經(jīng)典液相色譜曲缺點(diǎn)，從而達(dá)到高效、快速、靈敏。
2、簡述液相色譜中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素，如何減少諳帶擴(kuò)張、提高柱效?
解：液相色譜中引起色諾峰擴(kuò)展的主要因素為渦流擴(kuò)散、流動相傳質(zhì)、停留流動相傳質(zhì)及柱外效應(yīng)。
在液相色譜中要減小譜帶擴(kuò)張，提高柱效，要減少續(xù)料顆粒直徑，減小境料孔穴深度，提高裝填的均勻性，采用低粘度溶劑作流動相，流速盡可能低，同時要盡可能采用死體積較小的進(jìn)樣器、檢測器、接頭和傳輸管線等。
3、為什么要提出折合參數(shù)?有何特點(diǎn)?
解：我們知道色譜操作條件對板高是有影響的.Giddings發(fā)現(xiàn)，固定相相同，填充良好，共是粒度dp不同，因而H-u曲線不同，在液相色譜中，培板高度是粒度的函數(shù)，為了比較不向色譜條件下的板**.提出折合參數(shù)，包括折合板高、折合流速、折合柱長。其特點(diǎn)是對于不同粒度的填料能得到相同的H—ur 曲線，因此可以在相同的條件下比較不同填料的柱效。
4、高效液相色譜柱有哪幾種類型? 細(xì)徑柱有什么優(yōu)點(diǎn)?
解：高效液相色譜拄大致可分為三種類型：內(nèi)徑小于2mm的稱為細(xì)管徑或微管徑柱;內(nèi)徑在2~5mm范圍內(nèi)的是常規(guī)高效液相色譜柱;內(nèi)徑大于5mm的一般稱為半制備柱或制備柱。細(xì)管徑柱的主要優(yōu)點(diǎn)是：（1）分離效能高。（2）流動相*佳流速低，消耗量少。（3）可采用多種檢測器，便于聯(lián)用（CLC MS，CLC-FTIR）。（4）采用細(xì)而短的毛細(xì)管柱可以提高分析速度，實(shí)現(xiàn)快速分析。
5、對液相色譜流動相有何要求?
解：用作液相色譜流動相的溶劑，其純度和化學(xué)特性必須滿足色譜過程中穩(wěn)定性和重復(fù)性的要求。對樣品要有一定的溶解能力，粘度小，化學(xué)穩(wěn)定性好，避免發(fā)生不可逆的化學(xué)吸附。溶劑應(yīng)與檢測器相匹配，不干涉所使用檢測器的工作，制備色譜的溶劑應(yīng)不干擾對分離各組分的回收。除此以外，選擇的溶劑對所給定的樣品組分具有合適的極性和良好的選擇性。
等等等等