3D原位细胞切割成像系统

原位细胞3D切割成像平台

■  染色体切割

■  亚细胞器的实时观测切割

■  原位组织的单细胞分离

■  薄组织的显微切割

■  基于激光的光转染技术

是一款非接触的3D纳米激光活细胞显微成像切割系统。它具特色的多光子切割技术，能够从细胞内或组织内的任意点开始切割，实现真正意义上的定点操作。并且CellSurgeon还配有MPM成像?？?，能够实现实时的荧光标记或无标记成像，定位所需操作的部位和实时观测细胞动态变化。通过CellSurgeon研究者能够进行实时的活细胞、组织操作和观测，帮助研究者更好的研究原位细胞的生理活性

传统切割对比

有别于传统的薄片切割系统，这种切割无需借助外力，能够有效避免金属刀片带来的金属污染和机械力损伤。

这种切割技术也克服了传统激光切割技术必须从表面开始切割并且会灼烧样品的缺点

使用特的双光子切割技术，有效避免传统激光切割缺点，真正做到了从任意点开始的3D切割，并且对于样品没有灼烧

传统（左）--本系统（右）

突破优势：

■  更适合样本种类：小鼠胫骨等小鼠骨骼系统，牙齿，样本较??；

■  更适合高精度的激光切割，切片后直接染色成像；

■  可切割的样品种类：牙齿、骨骼等生物硬组织，各种聚合物材料，软组织，含有金属的硬组织或者软组织

■  样品处理方式：硬组织无需脱钙、软组织无需固定

■  可适用染色方法：HE染色常规及TRAP、Masson等特殊染色方法

■  切片过程全自动控制

■  薄切片厚度：硬组织切片10 μm

■  切片速度：≥1 mm2/s

■  切割过程不会污染、灼伤或机械力损伤样品

■  激光光源类型：红外飞秒脉冲激光

■  成像技术：光学相干断层扫描（OCT）

3D原位细胞切割成像系统

应用：

可视化切片系统，实现边看边切

对于病理等多种研究来书，涉及到组织切片的内容， 困难的部分莫过于寻找病变部位。 相比一个完整组织来说， 有时候研究者所关注的部分仅仅是其中变异的一小部分组织的形态而已。 但是对于传统切片手段来说， 缺乏一种有效的手段来定位这个区域， 因此往往需要投入大量人力和物力去多次制样，大量切片来寻找这个部位。 TissueSurgeon 自身集成了适合深层组织细胞成像的光学相干断层扫描（OCT）成像功能， 帮助您直接定位到 ROI 区域。 让切片变得可视化， 实现更加和可控的切片。为研究者更加迅速直观的找到病变位置，大大提高了研究效率。

青鳉胚胎组织的单细胞提取

单细胞的原位组织提取一直以来都是一项十分困难的工作，这主要受制于组织之间连接致密难以消化，而机械力往往很难地将单个细胞与组织完整的分离。激光切割具有传统切割技术所难以匹及的切割精度，是目前一种比较理想的切割手段，因此围绕激光切割技术的相关显微产品也孕育而生，并在科研领域中越来越受到关注。但是激光切割也有其局限性，先显微激光切割往往要从表面开始，无法对深层组织进行切割；另一方面激光的光源往往采用紫外激光光源，这种类型的光源很容易造成组织灼伤，从而影响切割下来样品的品质，因此激光切割的应用发展也受到了诸多限制。

青鳉是一种成熟的模式生物，常用于分析发育和发育过程中的细胞信号神经生物学研究。其中使用表达荧光蛋白的转基因胚胎是一种揭示胚胎发育的良好方法。随着基因技术的发展，研究者们越来越多地开始关注这些标记细胞中转录组中的信息。虽然单细胞测序技术发展迅速，但是从组织中获得单细胞的手段却十分有限。目前几乎没有手段能够直接在组织的原位上快速获取一个细胞，但是基于ROWIAK双光子切割技术，研究者成功地在这方面取得了一些进展。

为了研究青鳉感觉神经分泌细胞细胞群中特定表达m-cherry的转基因细胞的内部遗传信息，将ROWIAK双光子3D组织切割成像系统与传统的显微操作系统进行结合，成功实现了对目标细胞的原位分离。

利用双光子3D组织切割成像系统对青鳉胚胎中的mcherry细胞进行了定位，然后根据其细胞群的形态设定了切割部位，随后系统根据预先设定的范围进行切割。待切割完成后使用玻璃微管移液器将目标的细胞部位直接取出，即获得了目标组织区域。这种方法能够在不破坏样品原位信息的情况下将感兴趣的部位直接的分离，这对于揭示生物体的基因表达情况具有着深远的意义

基于激光的原位细胞转染

无论是电转还是脂质体都需要先将细胞悬浮才能够进行入转染，但是Cellsurgeon能够在原位对细胞进行光穿孔实现细胞的转染