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離心機在細(xì)菌學(xué)診斷分離培養(yǎng)技術(shù)中的應(yīng)用

閱讀:3542      發(fā)布時間:2013-2-22
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在細(xì)菌學(xué)診斷工作中,常需要從被檢材料中分離細(xì)菌,并獲得純培養(yǎng)(即單*種細(xì)菌的培養(yǎng)物)。因此,通常要用到離心機對樣品進行離心分離,細(xì)菌的離心機分離培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)菌學(xué)診斷中的一項重要基本操作。

分離細(xì)菌的方法很多,常用的有以下幾種。

將被檢材料接種于適宜培養(yǎng)基,再于固體培養(yǎng)基表面生長的菌落中,選樣欲分離菌的單個菌落,移種于另一適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)。因為一個菌落通常由一個細(xì)菌生長繁殖所形成,故培養(yǎng)出的細(xì)菌是單一的種類,即純培養(yǎng)。

用特殊的培養(yǎng)環(huán)境(如厭氧、二氧化碳環(huán)境等)分離細(xì)菌。

將被檢材料接種子易感動物體內(nèi),使病原菌在動物體內(nèi)繁殖,然后從動物體內(nèi)取材料利用離心機進行離心分離出需要的成分后培養(yǎng)。利用某些細(xì)菌對一些理化因素有特殊抵抗力,用理化方法處理接種材料,殺死其他微生物而保存需要的細(xì)菌,再分離培養(yǎng)。

一般情況下,被檢材料用前兩種方法分離培養(yǎng)即可。如披撿材料污染嚴(yán)重,可先用后兩種方法處理,再用前兩種方法獲得純培養(yǎng)。

在分離培養(yǎng)操作中,嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。所有用具、培養(yǎng)基、試劑都要經(jīng)過滅菌,而且不能長時間暴露于空氣中。禁止用手接觸或用口吹已滅菌的器皿內(nèi)部。

根據(jù)被檢材料中可能存在的病原苗的特性,選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件:(溫度、氣體環(huán)境等)。進行未知菌的初次分離,多用幾種培養(yǎng)基,如肉湯、鮮血瓊脂、麥康克瓊脂等,每種培養(yǎng)基接種數(shù)管,分別放在普通環(huán)境和厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。一般經(jīng)過24—78小時觀察結(jié)果,但也有一些病原菌,需要培養(yǎng)校長時間才能生長。

被檢材料一般不需要處理,直接按種于培養(yǎng)基上。當(dāng)懷疑為有芽腦的病原苗時,可將被檢材料加生理鹽水磨碎,作成1:10乳劑(液體材料不必稀釋),置60-80℃水浴中20—30分鐘,以殺死無芽胞的雜菌,然后再接種于培養(yǎng)基中。

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