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細胞培養(yǎng)常見污染識別及處理

時間:2017/6/6閱讀:2712
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細胞培養(yǎng)常見污染識別及處理

參考格式:
1.內(nèi)容(含圖片)來源:原創(chuàng)、非原創(chuàng)(請說明具體來源)
2.細胞基本信息:名稱、種屬來源、凍存液、傳代數(shù)、傳代方法、培養(yǎng)基等。
3.圖片:如污染前圖片、處理后圖片
4.污染識別(含試劑盒檢測)、污染 處理的過程。
5.心得體會。 也歡迎各位戰(zhàn)友積極討論、發(fā)表自己獨到的見解。
小黑點:不隨細胞生長而繁殖,可能是磷酸鈣沉淀,反之,可能是黑焦蟲,鏡下會動,會影響細胞生長或重組細胞蛋白表達。
貼壁的黑色碎片可能是細胞裂解碎片。
霉菌污染:貼壁培養(yǎng)有絲狀白色,嚴重的的霉斑,絮狀,如果在發(fā)酵罐,白色的小球,像碾碎的泡沫塑料。
大腸細胞絮狀結(jié)團漂浮,培養(yǎng)液渾濁
鏈球菌:圓形,亮點,三三兩兩連接
細胞中如果污染細菌,zui常見的有革蘭陽性菌,如枯草桿菌。以及大腸桿菌、假單孢菌等革蘭陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。培養(yǎng)細胞受細菌污染后,會很快出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,pH改變。
也有少數(shù)培養(yǎng)液肉眼觀察無多少改變,只能在鏡下發(fā)現(xiàn)菌體才知污染。所以,每天應(yīng)仔細觀察。污染后細胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多、增粗,zui后變圓脫落死亡,造成試驗失敗和細胞株(系)丟失。
判斷污染的方法:如果是細菌污染,應(yīng)該很快培基就渾濁了。如果是真菌感染,特別是初期感染,在低倍鏡下可以看到小黑點,特別是成團的小黑點,要特別注意。如果無法確定,就換高倍鏡,如果是死細胞,高倍鏡下就可以分辨,而真菌高倍鏡下仍然是小黑點。有些(比如支原體)污染,鏡檢是看不到的,但是細胞的生長異常。
 

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