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目录:上海一研生物科技有限公司>>抗体>>单克隆抗体>> 磷酸化蛋白激酶B抗体

磷酸化蛋白激酶B抗体
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更新时间:2024-12-01 20:42:51浏览次数:385评价

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产品名称

货号

英文名称

规 格

     

抗体来源

磷酸化蛋白激酶B抗体

EY-992K

phospho-AKT   Ser473)

0.2ml/200μg

1mg/1ml

Rabbit

 

9.jpg

交叉反应

Human,   Mouse, Rat,  predicted: Chicken, Dog,   Pig, Cow, Rabbit, Sheep,

产品类型

一抗

研究领域

肿瘤  细胞生物  神经生物学  信号转导  细胞凋亡  转录调节因子  激酶和磷酸酶

理论分子量

56kDa

   

Lyophilized   or Liquid

免 疫 原

KLH   conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human AKT around the   phosphorylation site of Ser473: QFp-S)YS

   

IgG

纯化方法

affinitypurified   by Protein A

储 存 液

0.01M   TBSpH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件

Store   at -20 °C for one year.

产品应用  WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=2ug/Test IF=1:100-500 石蜡切片需做抗原修复)

not yet tested inother applications.

optimaldilutions/concentrations should be determined by the end user.

别 名  AktPhospho-Ser473); AKT phospho-S473); AKT phospho Ser473); p-AKT Ser473); AKT 1; AKT; AKT1; AKT-1; AKT1_HUMAN; C AKT; cAKT; MGC9965; MGC99656; Oncogene AKT1; PKB; PKB alpha; PKB-ALPHA; PRKBA; Protein Kinase B Alpha; Protein kinase B; Proto-oncogene c-Akt

 


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10.jpg

一、 免疫动物选择

根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。

二、抗原免疫

将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应??梢匝≡癫煌拿庖呗废?,如皮下、腹腔、静脉等。

三 、细胞融合

从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。

四、 杂交瘤细胞筛选

对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。

五、 单克隆抗体生产

从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。

六、抗体纯化

通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。

七、 鉴定和验证

对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。

八、应用

将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。

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一抗可用于检测糖尿病、癌症、阿尔茨海默病和帕金森病的生物标志物。二抗则主要用于检测和纯化抗原蛋白。

二抗在标记和检测方面比较灵敏和灵活。所以,它们在流式细胞术、蛋白质印迹和细胞成像等一系列应用中用于一抗的比色、化学发光和荧光检测。二抗类型的选择基于一抗的类别:免疫球蛋白 IgG 或 IgM、标签类型和来源宿主。

由于大多数一抗是使用少数宿主物种开发的,并且大多数一抗属于 IgG 类,因此制造商通常提供可用于许多不同检测程序和系统的即用型二抗。常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗鸡 IgG 或抗山羊 IgG。所选择的二抗应始终能够识别产生一抗的宿主物种,例如,为了检测从小鼠产生的一抗,使用抗小鼠二抗。在 ELISA 和蛋白质印迹中,标记通常是化学发光、比色或基于荧光的,但在流式细胞术和免疫荧光中,仅使用荧光标记。



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