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抗體的溶解方法

閱讀:1516      發(fā)布時間:2024-1-12
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一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機體產(chǎn)生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。
抗體溶解方法:
方法一:我們的抗體(凍干粉)已經(jīng)包含了0.01M PBS、1%BSA和0.1%防腐劑,您只需要加入滅菌的雙蒸水就行了??贵w溶解后,置于-20℃保存,分裝后使用,避免反復(fù)凍融,可保證至少1年有效;
方法二:也可以只加入一半體積的雙蒸水,再用一半體積的甘油補足,置于-20℃保存,這樣抗體不會凍,有利于抗體的穩(wěn)定。
后續(xù)試驗時,再使用對應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液,即用即配。
我們的抗體(凍干粉),在常溫放置下,至少一個月有效;若在-20℃下保存(推薦),至少三年有效。
抗體修復(fù)方式:
修復(fù)液:0.01M枸櫞酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
抗體修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫。
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。

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