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5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白試劑盒的樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作

閱讀：960 發(fā)布時間：2023-1-13

　　5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。往預(yù)先包被胎盤催乳素抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物顯色，在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中試劑盒指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀測定吸光度，計(jì)算樣品濃度。

　　5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白試劑盒的樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

　　液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

　　（1）血清

　　室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　?。?）血漿：

　　應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　?。?）尿液：

　　用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

　?。?）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

　　檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。

　?。?）培養(yǎng)細(xì)胞

　　檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度高。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　　（6）組織標(biāo)本

　　切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS，或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

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