1 培養(yǎng)基滅菌方法的選擇
滅菌是指利用物理或化學(xué)法殺或除去物料及設(shè)備中一切有生命物質(zhì)的過程。滅菌方法大致可分為物理方法和化學(xué)方法兩種。物理方法主要有蒸汽(高溫)、 電磁波和輻照等方式， 蒸汽滅菌屬于經(jīng)典式的滅菌方法， 而電磁波滅菌多采用 2450nm和915nm微波滅菌和超聲波滅菌。輻照滅菌可分為離子性輻照和非離子性輻照。非離子性輻照采用zui廣泛的是253．7n m波長(zhǎng)的紫外線，由于光源發(fā)出的強(qiáng)度所限，雖不存在殘留問題，但以上物理滅菌方法都有一定的局限性?；瘜W(xué)方法多采用強(qiáng)氧化劑，如過氧化氫、過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、鹵素等， 化學(xué)滅菌主要是依靠強(qiáng)氧化劑的氧化能力與細(xì)胞酶蛋白中的一SH一巰基結(jié)合轉(zhuǎn)化為一SS一 基，破壞蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)，干擾細(xì)菌酶系統(tǒng)的代謝，使其失去活性。按照分子生物學(xué)的觀點(diǎn)，就是對(duì)細(xì)胞的DNA進(jìn)行氧化性損傷，從而抑制細(xì)胞的增殖。使用化學(xué)滅菌會(huì)對(duì)
容器和包材以及設(shè)備產(chǎn)生一定量的殘留污染，必須采取嚴(yán)格的措施控制殘留，以保障zui終產(chǎn)品的安全性。
利用飽和蒸汽進(jìn)行滅菌的方法稱為濕熱滅菌法。由于蒸汽具有很強(qiáng)的穿透能力，而且在冷凝時(shí)會(huì)放出大量的冷凝熱，很容易使蛋白質(zhì)凝固而殺死各種微生物。從滅菌的效果來看，干熱滅菌不如濕熱滅菌有效，溫度升高10℃時(shí)，滅菌速度常數(shù)僅增加2—3倍，而濕熱滅菌對(duì)耐熱芽孢的滅菌速度常數(shù)增加的倍數(shù)可達(dá)到8一l0倍，對(duì)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞則更高。
2 濕熱滅菌原理
在發(fā)酵工業(yè)中，對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備的滅菌，廣泛使用濕熱滅菌法。工廠里，蒸汽比較容易獲得， 控制操作條件方便，是一種簡(jiǎn)單 而又價(jià)廉、有效的滅菌方法。用濕熱滅菌的方法處理培養(yǎng)基，其加熱溫度和受熱時(shí)間與滅菌程度和營(yíng)養(yǎng)成分的破壞都有關(guān)系。 營(yíng)養(yǎng)成分
的破壞將影響菌種的培養(yǎng)和產(chǎn)物的生成， 所以滅菌程度和營(yíng)養(yǎng)成分的破壞成為滅菌工作中的主要矛盾， 恰當(dāng)掌握加熱溫度和受熱時(shí)間是滅菌工作的關(guān)鍵。
微生物受熱死亡的原因，主要是因高溫使微生物體內(nèi)的一些重要蛋白質(zhì)，如酶等，發(fā)生凝固、變性，從而導(dǎo)致微生物無法生存而死
3 滅菌溫度和時(shí)間的選擇
當(dāng)培養(yǎng)基被加熱滅菌時(shí)，常會(huì)出現(xiàn)這樣的矛盾，在加熱殺死微生物的同時(shí)，培養(yǎng)基中的有用成分也會(huì)隨之遭到破壞。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，在高壓加熱的情況下，培養(yǎng)基中的氨基酸和維生素極易被破壞如在121℃，僅20 min，就有59％的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。因此，選擇一種既能滿足滅菌要求又能減少營(yíng)養(yǎng)成分破壞的溫度和受熱時(shí)間，是研究培養(yǎng)基滅菌質(zhì)量的重要內(nèi)容
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