A. 低溫保存管之臨時存放及解凍中之一般菌種臨時存放及活化
1. 低溫保存管（cryo tube）應(yīng)存放于－20℃ ~ －80℃之低溫條件下。
2. 準(zhǔn)備 37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在電氣水浴槽中改放酒精，不可以火加溫，以免危險(xiǎn)；若以 37℃水浴取代，應(yīng)避免水中微生物污染），其中事先安放小試管架（可放置 cryo tube 之大?。好娌豢筛哌_(dá)管塞。
3. 將 cryo tube 從低溫保存條件中取出，置于 37℃浴槽之小試管架上。
4. 不斷輕微搖動 cryo tube，液面不可高至管塞，直至結(jié)冰*溶解（約需 2 分鐘）。
B. 菌株活化: 在無菌操作下
1. 用無菌微量吸管，從已溶解之cryo tube 吸取 1-2滴之菌液，滴入固態(tài)培養(yǎng)基(培養(yǎng)基編號及溫度示于菌株訂購單)某一邊緣附近，以劃線法接種于培養(yǎng)基。
2.將接種好的培養(yǎng)基置于溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
C. 劃線法
1. 手持金屬接種環(huán)，用酒精燈將接種環(huán)（共約5公分）燒至火紅，并不斷來回?zé)窘饘俟潭U之前約10公分，等待約10秒鐘，將接種環(huán)前端輕觸培養(yǎng)基邊緣凝膠（無菌體部份），待接種環(huán)*冷卻后，以環(huán)沾黏菌滴，由培養(yǎng)基邊緣向中央輕輕橫劃緊接的并行線，直到涵蓋1/3培養(yǎng)基為止（I區(qū)）。
2. 灼燒接種環(huán)，待數(shù)秒冷卻后，旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)基自I區(qū)涂布的邊緣再橫劃數(shù)條線到未接種的區(qū)域（II區(qū)）。
3. 重復(fù)2的動作完成III 區(qū)與IV 區(qū)。
4. 灼燒接種環(huán)，將接種環(huán)歸位。
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