1.青海發(fā)光桿菌的質(zhì)量:保藏的菌種應(yīng)培養(yǎng)在營養(yǎng)豐富的zui適條件下,使之進(jìn)入穩(wěn)定期,稍老一些的菌體對(duì)環(huán)境抵抗力強(qiáng)。另處,作為冷凍干燥的菌懸液細(xì)胞濃度要高不同的菌對(duì)冷凍程度不同,如果保存的菌液細(xì)胞濃度不高,就會(huì)使以后傳種造成困難,保存期也會(huì)受到影響。
2.保護(hù)劑:不同種類的保護(hù)劑對(duì)不同微生物的作用是不同的,如個(gè)別菌種在脫脂乳作保護(hù)劑的情況下死亡率達(dá)99.99%,而采用葡聚糖等混和保護(hù)劑時(shí)死亡率大大減少。一般情況下,那些容易保存的菌種對(duì)保護(hù)劑的要求不很嚴(yán)格,而不易保存的菌種對(duì)保護(hù)劑的要求卻很苛刻。因此,選擇好的保護(hù)劑是冷凍干燥保存菌種的關(guān)鍵因素。
3.干燥速度:實(shí)驗(yàn)表明,慢速干燥比快速干存活率高,如青霉菌6h干燥存活率為67.3%,而3h為59%。
4.空氣的影響:冷凍干燥后空氣對(duì)細(xì)菌細(xì)胞影響較大,可導(dǎo)致細(xì)胞損傷進(jìn)而死亡,故在凍干后應(yīng)立即在真空下融封,青海發(fā)光桿菌才有利于長期保存。
5.溫度的影響在干燥和真空狀況下溫度的影響遠(yuǎn)沒有上述項(xiàng)因素重要,因此可以在室溫下保存,但許多生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。
6.含水量的影響:水分含量過高對(duì)菌存活不利,*脫水也不利于保存,一般把干燥的細(xì)胞含水量控制在3%以下(1%~3%)。
7.復(fù)蘇培養(yǎng):打開安瓿管后加入無菌水使凍干菌融化,青海發(fā)光桿菌融化速度慢比快速融化的成活率要高。
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