培養(yǎng)基促生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)分析
操作方法
對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基
用已經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)證明合格的培養(yǎng)基或購(gòu)買(mǎi)的有質(zhì)量證書(shū)的成品平皿培養(yǎng)基作為對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基.
實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基
將瓊脂類(lèi)的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基加熱融化后,冷卻至45℃左右,以無(wú)菌的方式在無(wú)菌培養(yǎng)皿中注入15~20ml,備用。液體類(lèi)的培養(yǎng)基直接使用。
菌懸液的制備
細(xì)菌菌懸液的制備
方法一:取細(xì)菌的斜面培養(yǎng)物1耳匙接種在酪蛋白大豆消化肉湯培養(yǎng)基中30~35℃培養(yǎng)18~24h,取上述培養(yǎng)物用無(wú)菌水按10倍系列稀釋?zhuān)謩e制成10-7~10-8的菌懸液備用。
霉菌菌懸液的制備
取白色念珠菌的斜面培養(yǎng)物1耳匙接種在沙氏瓊脂斜面上于20~25℃培養(yǎng)24~48h,加入無(wú)菌水4ml制成原液,取上述原液按10倍系列稀釋?zhuān)謩e制成10-6~10-7的菌懸液備用。
取黑曲霉的斜面培養(yǎng)物加入無(wú)菌水4ml制成孢子懸液,取上述孢子懸液按10倍系列稀釋?zhuān)謩e制成10-6~10-7的菌懸液備用。
方法二:直接用杭州微球生物技術(shù)有限公司的產(chǎn)品-培養(yǎng)基靈敏度指示劑,該產(chǎn)品已經(jīng)幫我們控制了細(xì)菌數(shù)量,只要直接拿稀釋液稀釋下就可以直接取到10~100CFU試驗(yàn)菌。使用方便,數(shù)量。推薦用此方法操作。
培養(yǎng)基的生長(zhǎng)促進(jìn)實(shí)驗(yàn)
瓊脂類(lèi)培養(yǎng)基的生長(zhǎng)促進(jìn)實(shí)驗(yàn)
每株菌用2個(gè)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基平皿,用表面涂布法在每個(gè)平皿表面接種0.1~0.5ml的菌懸液(約10~100CFU試驗(yàn)菌),同時(shí)用2個(gè)對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基平皿做對(duì)照,接種相同量的菌懸液試驗(yàn),在規(guī)定溫度下培養(yǎng),取出平皿點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基上的微生物數(shù)量應(yīng)為對(duì)照培養(yǎng)基上微生物生長(zhǎng)數(shù)量的70%-150%范圍內(nèi)。(注:每種培養(yǎng)基生長(zhǎng)促進(jìn)實(shí)驗(yàn)的具體菌株見(jiàn)附錄1)
液體類(lèi)培養(yǎng)基的生長(zhǎng)促進(jìn)實(shí)驗(yàn)
每株菌用2管(或瓶)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基,接種0.1~0.5ml的菌懸液(約10~100CFU試驗(yàn)菌),同時(shí)用2個(gè)對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基或用已知合格的酪蛋白大豆消化瓊脂平皿做對(duì)照,接種相同量的菌懸液試驗(yàn),在規(guī)定溫度下培養(yǎng),對(duì)比或計(jì)數(shù),在規(guī)定時(shí)間內(nèi)能生長(zhǎng)菌落為合格。
液體培養(yǎng)基的生長(zhǎng)促進(jìn)特性試驗(yàn)
接種0.1~0.5ml的菌懸液(約10~100CFU試驗(yàn)菌)于一定量適合的培養(yǎng)基。在特定溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間不超過(guò)試驗(yàn)中規(guī)定的zui短期限。與對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基獲得的微生物生長(zhǎng)相比,接種微生物的生長(zhǎng)應(yīng)明顯。
固體培養(yǎng)基的生長(zhǎng)促進(jìn)特性試驗(yàn)
采用表面涂布法,在每一塊平皿上接種0.1~0.5ml的菌懸液(約10~100CFU試驗(yàn)菌)適宜微生物。在特定溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間不長(zhǎng)于試驗(yàn)中規(guī)定的zui短期限。接種微生物的生長(zhǎng)與對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基獲得的微生物生長(zhǎng)相當(dāng)。
液體或固體培養(yǎng)基的抑制特性試驗(yàn)
用適當(dāng)培養(yǎng)基接種至少100 CFU適宜微生物。在特定溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間至少為試驗(yàn)中規(guī)定的zui長(zhǎng)期限。無(wú)受試微生物生長(zhǎng)。
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