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流式細(xì)胞儀分選方法

閱讀:3620      發(fā)布時間:2019-9-3
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對FACSAria流式細(xì)胞儀96孔微孔板單個細(xì)胞分選方法進(jìn)行優(yōu)化和應(yīng)用。通過對液流的調(diào)節(jié).獲得較穩(wěn)定的分選設(shè)定值;在96孔微孔板蓋上分選肉眼可見液滴,確定分選液滴在96孔微孔板每孔相對應(yīng)的蓋上的位置;分選結(jié)束后,計數(shù)單個細(xì)胞存在的細(xì)胞孔數(shù);分選細(xì)胞培養(yǎng)7d后.記錄單個細(xì)胞存在孔數(shù)及單克隆形成的數(shù)量。結(jié)果5個細(xì)胞形成的液滴即肉眼清晰可見;96微孔板有單個細(xì)胞的孔數(shù)為80~90個,單個細(xì)胞獲得率為83.3%~93.7%,培養(yǎng)7d后,有活細(xì)胞存在的孔數(shù)為5~38孔,即單克隆形成率為6.3%~42.2%。分選前在96孔微孔板板蓋上分選肉眼可見液滴的簡單方法使得對液流位置的判斷直觀可見:流式細(xì)胞儀96孔微孔板單細(xì)胞分選是一種簡單易行,準(zhǔn)確有效地獲得單個細(xì)胞和單克隆的方法。

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