罗斯肉瘤病毒RT-PCR试剂盒

Rous′ Sarcoma Virus(RSV)

产品及特点

罗斯肉瘤病毒(Rous Sarcoma Virus，RSV)又称 Rous 肉瘤病毒或劳氏肉瘤 病毒，是由美国病理学家劳斯(F. P. Rous)在 1910 年发现。把禽类的恶性肉瘤 的组织液经滤筒滤出液接种于另外一些正常鸡，结果发现这些正常鸡也生长出具 有与病禽肉瘤一样的恶性肿瘤，并从滤液中分离出能引起肉瘤的因子，继而又把 该因子称之为劳氏肉瘤病毒。它是属于动物病毒中的单链 RNA 病毒类。目前主 要用于对癌和疫苗的研究上。本产品根据 PCR 原理开发，可用于科研领域快速 检测罗斯肉瘤病毒。它具有下列特点： 

1. 一站式，用于不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。

2. 根据罗斯肉瘤病毒的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。

3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。

4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间 转移样品，降低了操作误差和可能的污染。

5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。

6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。

罗斯肉瘤病毒RT-PCR试剂盒规格及成分

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分 分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。 

自备试剂 样品 RNA

使用方法 一、样品 RNA 的制备

1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性 对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 流行性出血热病毒 PCR 阳性对照的 100 倍稀释作为制备的阳性对照；用水作为制备的阴性对照。 制备所得成为样品 RNA。

2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提 取试剂盒兼容。

二、设置 RT-PCR 反应（20μL 体系）

3. 如果有 N+2 个样品，则标记 N+4 个 PCR 管（额外增加的两个管一个是 RT-PCR 阳性对照，另一个是 RT-PCR 阴性对照）并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分：

4. 上机进行 RT-PCR，RT-PCR 反应参数为:

5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物， 则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、 阳性对照有 122bp 预期的扩增产物的情况下，才有必要分析样品的实验结果， 如果有扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。