真鲷虹彩病毒PCR试剂盒

Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)

产品及特点

真鲷虹彩病毒(Red Sea Bream Iridovirus，RSIV)会引起真鲷虹彩病毒 病，主要是水平传播，通过水平途径在水体、饵料和鱼体间进行传播和感染， 主要危害幼鱼，发病后死亡率高达 37.9%。病鱼体色变黑，嗜睡，贫血症状明 显；体表和鳃出血，鳃上有瘀斑，呈灰白色；脾脏肥大。病毒对鱼体上皮组织和 内皮组织亲嗜性较强，对脾脏、肾脏等鱼类造血器官和组织的破坏尤为严重， 从而导致病鱼贫血、多器官衰竭而死亡，因此真鲷虹彩病毒的快速准确鉴定对 该病的预防和检疫有着重要作用。本产品就是根据真鲷虹彩病毒保守区设计引 物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增真鲷虹彩病毒，与其他病原没有交 叉反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

真鲷虹彩病毒PCR试剂盒规格及成分

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 

4. 按下表设置 PCR 反应：

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。