梭状芽孢杆菌属通用PCR试剂盒

Clostridium spp.

产品及特点

梭状芽孢杆菌（Clostridium spp.）属于孢子菌，在自然界中是一种非常 *的种类。本菌属细菌在自然界分布广泛，常存在于土壤、人和动物肠道以 及物中。多为腐物寄生菌，少数为致病菌，能分泌外毒素和侵袭性酶类， 引起人和动物患病。因此快速灵敏检测梭状芽孢杆菌具有重要的意义，本试剂 盒就是为此目的根据 PCR 原理开发，它具有下列特点： 

1. 即开即用，用户只需要提供细菌 DNA 模板。 

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增梭状芽苞杆菌 DNA，跟其他微生物 无交叉反应。能检测出的梭状芽苞杆菌包括丁酸梭菌、产气荚膜梭菌、新 生儿梭菌、生胞梭菌、艰难梭菌、双酶梭菌、乙二酸梭菌、索氏梭菌等。 

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

梭状芽孢杆菌属通用PCR试剂盒规格及成分

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。  

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 芽孢杆菌通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 

4. 按下表设置 PCR 反应：

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。