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上海信裕生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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玫瑰花探針法PCR鑒定試劑盒(不含內(nèi)參)

參   考   價(jià): 3990

訂  貨  量: ≥1 盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌信裕生物

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時(shí)間:2025-05-07 13:57:55瀏覽次數(shù):569次

聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)
純度 99 供貨周期 一周
規(guī)格 50次 貨號(hào) XY999177P15
應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 僅用于科研
玫瑰花探針法PCR鑒定試劑盒(不含內(nèi)參)基于 TaqMan 探針法實(shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù)。針對玫瑰花的特定基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,當(dāng)反應(yīng)體系中存在玫瑰花的核酸模板時(shí),PCR 反應(yīng)啟動(dòng)。在擴(kuò)增過程中,Taq 酶會(huì)切割與擴(kuò)增產(chǎn)物雜交的熒光探針,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而釋放熒光信號(hào)。通過儀器對 PCR 過程中相應(yīng)通道的信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測和分析,實(shí)現(xiàn)對玫瑰花核酸的定性或定量檢

玫瑰花探針法PCR鑒定試劑盒(不含內(nèi)參)

Flos rosae rugosae(Rosa rugosa) Probe qPCR Kit (without internal control)


玫瑰花探針法PCR鑒定試劑盒(不含內(nèi)參)產(chǎn)品及特點(diǎn):
基于 TaqMan 探針法實(shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù)。針對玫瑰花的特定基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,當(dāng)反應(yīng)體系中存在玫瑰花的核酸模板時(shí),PCR 反應(yīng)啟動(dòng)。在擴(kuò)增過程中,Taq 酶會(huì)切割與擴(kuò)增產(chǎn)物雜交的熒光探針,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而釋放熒光信號(hào)。通過儀器對 PCR 過程中相應(yīng)通道的信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測和分析,實(shí)現(xiàn)對玫瑰花核酸的定性或定量檢測4它具有下列特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板。

2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,分析靈敏性高,可以達(dá)到 100 拷貝/反應(yīng)。

3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 特異性高,引物是根據(jù)玫瑰花DNA 高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他的 DNA 發(fā)生交叉反應(yīng)。

5. 既可用于定性檢測,又可用于定量檢測。用于定量時(shí)其線性范圍不少于 5 個(gè)數(shù)量級(jí)。

6. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 PCR 反應(yīng)。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研。

規(guī)格及成分:

成分

編號(hào)

規(guī)格

包裝材料

2×Probe qPCR MasterMix

試劑一

0.5 mL

0.5 mL 本色蓋

熒光 PCR 專用模板稀釋液

試劑二

1 mL

1.5 mL 綠色蓋

超純水

試劑三

1 mL

1.5 mL 藍(lán)色蓋

玫瑰花qPCR引物-探針混合液

試劑四

150 μL

0.5 mL 棕色管

玫瑰花qPCR陽性對照

(1×10E7 拷貝/μL)

試劑五

50 μL

0.5 mL 黃色蓋

使用手冊


一份

運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為 12 個(gè)月。
自備試劑 樣品 DNA。

玫瑰花探針法PCR鑒定試劑盒(不含內(nèi)參)

玫瑰花探針法PCR鑒定試劑盒(不含內(nèi)參)使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E1-10E6 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2,1。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,最好用帶芯槍頭,下同)。

3. 在 6 號(hào)管中加入 5μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭,在 4 號(hào)管中加入 5μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E4 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 如果有 N 個(gè)樣品,最好設(shè)置 N+2 個(gè)提取,多出的一個(gè)是 PC(樣品制備陽性對照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 上步所得 4 號(hào)稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的起始體積一樣,以此作為

PC。另外用水作為 NC。

8. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)樣品 DNA 提取試劑盒兼容。也可以選購本公司的免提取核酸釋放劑。

三、Probe qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)

用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個(gè)用于 PCR 陽性對照(直接用第 6 步第 4 號(hào)管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。

10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后最后加):


成分

樣品管

N+2 個(gè)

PCR 陰性

對照

標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品管

(1-6 管)

2×Probe qPCR MasterMix

各 10μL

10μL

各 10μL

玫瑰花 qPCR

引物-探針混合液

各 3μL

3μL

各 3μL

N+2 個(gè)待測 DNA 樣本

各 7μL

不加

不加

超純水

不加

7μL

不加

第 6 步所得標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品稀釋液

(1-6 號(hào))

不加

不加

各 7μL(1 號(hào)樣

到 1 號(hào)管,2 號(hào)

樣到 2 號(hào)管…)

11. 蓋上蓋子后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR:

過程

溫度

時(shí)間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)

(45 個(gè)循環(huán))

95℃

15 sec

60℃

1 min(采集 FAM 通道的熒

光信號(hào),3`BHQ1 為淬滅基

團(tuán))

四、數(shù)據(jù)處理

12. 如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 DNA濃度的 log 值,再推算出其濃度。

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