ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法

一般而言，我們擬合ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線選用比較經(jīng)典的Curve Expert 1.3或者Curve Expert 1.4軟件。現(xiàn)在我們以Curve Expert 1.4為例，對ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法進(jìn)行詳述。
 
1. 點(diǎn)擊Curve Expert 1.4，打開應(yīng)用程序，截圖界面如下：
 

 
 
2.在X軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的OD值，Y軸輸入相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，截圖界面如下：  
 

 
3. 單擊上圖界面中的 圖標(biāo)，出現(xiàn)如下界面


 

4. 單擊上圖界面中的ALL OFF 按鈕，出現(xiàn)如下界面
 

 
 
5. 我們選擇Sigmoidal Models這種曲線擬合模型進(jìn)行ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合，點(diǎn)擊OK，出現(xiàn)下圖界面：
 

 
注意：上圖界面中的r值越高，即當(dāng)r值越接近1時，所擬合的曲線就越好，所得到的數(shù)值可靠性也就也高。


6. 在上圖空白界面，按[Ctrl]鍵+[L]鍵，出現(xiàn)如下界面
 
 

 
在上圖中輸入相應(yīng)的OD值（X值）后，點(diǎn)擊Calculate即可計(jì)算出待測物的濃度（Y值），待測物稀釋了多少倍就在所測值的基礎(chǔ)上乘以稀釋倍數(shù)即zui終濃度。

7. 點(diǎn)擊所繪制的曲線圖中左上方 按鈕，可以得到如下ELISA曲線擬合方程
 

 
 
8. 點(diǎn)擊下圖中 Copy 即可得到上圖界面中的曲線方程數(shù)據(jù)
 

 
 
Logistic Model: y=a/(1+b*exp(-cx))
Coefficient Data:
a =       -1.19763443774E+004
b =       -8.45403498052E+001
c =       1.30213993104E+000