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利用抗原親和純化多抗問題

時間:2016-11-10閱讀:953
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利用抗原親和純化多抗問題

首先,western blot不能用來說明抗體效價,而需要在嚴(yán)格確定抗原濃度的情況下,通過ELISA等實驗來說明。因為WB檢測的抗原蛋白是一種變性伸展的狀態(tài),而非活性狀態(tài);
第二,1:200的抗血清稀釋度(甚至1:20)可以得到背景較小的條帶,你的實驗可能需要充分washing及blocking,以減少非特異性吸附。
第三,不知你用什么方法染色?注意時間不要太長,能看到你的條帶即可,一般用DAB染色不超過5min(2~3min,37 C)。

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