蛋白質(zhì)分子中含有許多肽鍵，與雙縮脲結構相同，在堿性溶液中能與銅離子結合紫色的化合物（稱雙縮脲反應）在一定濃度范圍，顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度生正比，故可用比色法測定蛋白質(zhì)的含量，含有兩個以上的肽鍵物質(zhì)才有反應，故氨基酸無此反應。雙縮脲反應是指具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2+反應,生成紅紫色的絡合物.所有的蛋白質(zhì)均有此顯色反應.雙縮脲試劑就是指能與具有兩個以上肽鍵的化合物發(fā)生紅紫色顯色反應的試劑.它是NaOH和CuSO4兩種溶液鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑，發(fā)生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質(zhì)是在堿性環(huán)境下的Cu2+與雙縮脲試劑發(fā)生的紫色反應。而蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲（H2NOC-NH-CONH2）結構相似的肽鍵，所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應，可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。配位化合物（coordination compound）簡稱配合物,也叫錯合物、絡合物,為一類具有特征化學結構的化合物,由中心原子或離子（統(tǒng)稱中心原子）和圍繞它的稱為配位體（簡稱配體）的分子或離子,*或部分由配位鍵結合形成. 雙縮脲（NH2CONHCONH2）是兩個分子脲經(jīng)180℃左右加熱，放出一個分子氨后得到的產(chǎn)物。在強堿性溶液中，雙縮脲與二價銅離子形成紫色絡合物，稱為雙縮脲反應應。凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵，或能夠以一個中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮脲反應。此法的優(yōu)點是較快速 ，不同的蛋白質(zhì)產(chǎn)生顏色的深淺相近，以及干擾物質(zhì)少。主要的缺點是靈敏度差，不適合微量蛋白的測定。