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青島捷世康生物科技有限公司
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油紅O染色液(培養(yǎng)細胞專用)說明書

時間:2025/4/18閱讀:203
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產(chǎn)品簡介:

脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機溶劑(如乙醇等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位;2、結構脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等,傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色,油紅O是很強的脂溶劑和染脂劑, 較易與甘油三脂結合呈小脂滴狀,與磷脂結合力稍差,其染色原理一般認為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。

油紅O染色液(培養(yǎng)細胞專用)主要用于顯示人工培養(yǎng)細胞的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著,細胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴,鑒別培養(yǎng)細胞中所發(fā)生的變化及其性質(zhì),標本不采用含有乙醇的固定液,脂肪的陽性染色結果呈橘黃至紅色,但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。    該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成:

名稱

規(guī)格一

4×20ml

規(guī)格二

4×50ml

Storage

試劑(A): Cell ORO Fixative

50ml

100ml

RT

(B): ORO Stain

B1: ORO Stain A

12ml

30ml

RT

B2: ORO Stain B

8ml

20ml

4℃

B1:B2=3:2 比例混合靜置, 即為 ORO Stain,可靜置 20~40min 或3000rpm 離心 10 分鐘,取上清備用。

試劑(C): Mayer 蘇木素染色液

20ml

50ml

RT

試劑(D): ORO Buffer

20ml

50ml

RT

使用說明書

1 份

自備材料:

1、60%異丙醇、蒸餾水、PBS 緩沖液或生理鹽水

操作步驟(僅供參考):

1、 培養(yǎng)好的細胞樣品固定于 Cell ORO Fixative 15~25min。

2、 PBS緩沖液或生理鹽水稍沖洗,稍晾干。

3、 60%異丙醇滴洗 20~30s。

4、 滴加油紅O染色液密閉染色10~15min。

5、 60%異丙醇稍洗以便去除染液,PBS緩沖液或生理鹽水稍沖洗。

6、 Mayer 蘇木素染色液復染核2~5min。

7、 (可選)ORO Buffer 1min。

8、 蒸餾水漂洗 8~10min。

9、 晾干,鏡檢。

染色結果:

中性脂肪

橙紅色或橘紅色

細胞核

藍色

注意事項:

1、ORO 染色液不夠穩(wěn)定,易產(chǎn)生沉淀,不宜提前配制,可按需配制后采用靜置20~40min 或 3000rpm 離心10 分鐘,取上清備用。    

2、Mayer蘇木素染色液復染時間不能過長。

3、染色結果不能長期保存,應盡快觀察及照相。

4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5、試劑開封后請盡快使用,以防影響后續(xù)實驗效果。

 

 

有效期:12個月有效;常溫運輸,按要求保存。


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