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生化培養(yǎng)箱測定肉制品菌群的實驗步驟

閱讀:890      發(fā)布時間:2024-8-14
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實驗準備

      培養(yǎng)基配制:

      準備不同類型的培養(yǎng)基,如伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、乳糖膽鹽液體培養(yǎng)基等。

      按照配方準確稱量培養(yǎng)基成分,溶解于蒸餾水中。

      將配制好的培養(yǎng)基分裝到適當?shù)娜萜髦?,如試管、培養(yǎng)皿等。

      滅菌:

      使用高壓蒸汽滅菌器對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌,通常在121°C、15 psi(約1.05 kg/cm²)的條件下滅菌15至20分鐘。

      對實驗器材,如培養(yǎng)皿、移液管、試管等,進行干熱滅菌,通常在160°C至180°C的條件下滅菌2小時。

      采樣與培養(yǎng)

      采樣:

      從肉制品中取適量樣本,通常為25克。

      將樣本加入到含有225毫升已滅菌的乳糖膽鹽液體培養(yǎng)基的試管中。

      培養(yǎng):

      將接種后的試管放入生化培養(yǎng)箱中,設置適當?shù)臏囟龋ㄍǔ?6°C±1°C)。

      培養(yǎng)時間通常為18至24小時。

      觀察產氣情況與稀釋

      觀察產氣:

      培養(yǎng)結束后,觀察試管中的產氣情況,記錄陽性管數(shù)。

      系列稀釋:

      對樣本進行系列稀釋,以便于后續(xù)的微生物分離。常用的稀釋液包括生理鹽水、磷酸鹽緩沖液等。

      劃線與涂布

      平板劃線法:

      使用無菌接種環(huán),在已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基表面劃線,通過劃線來稀釋和分離微生物。

      涂布平板法:

      將系列稀釋后的樣本涂布在瓊脂培養(yǎng)基表面,使用無菌涂布器均勻涂布。

      鑒定

      菌落觀察:

      觀察培養(yǎng)基上的菌落特征,如大小、形狀、顏色、光澤等。

      革蘭氏染色與鏡檢:

      對疑似菌落進行革蘭氏染色,并在顯微鏡下觀察其形態(tài)和染色特性,以鑒定是否為特定菌種(如大腸菌群)。

      菌種保藏

      將分離純化后的菌種轉移到適當?shù)谋2亟橘|中,如瓊脂斜面、甘油管等,并存放在低溫(如-80°C)冰箱中,以備后續(xù)使用。

      這些步驟為一般的肉制品菌群測定流程,具體操作時可能需要根據實驗目的、所使用的培養(yǎng)基和儀器設備等因素進行調整


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