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SolarRed核酸染料的方法介紹

閱讀:1696      發(fā)布時(shí)間:2022-7-29
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SolarRed核酸染料2種使用方法:
1.膠染法
(1) 制膠時(shí)加入SolarRed核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL SolarRed 10,000× 儲液,以此比例類推)。
(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項(xiàng):
(1) 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做10050mL的膠。
(2) 由于SolarRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將SolarRed儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。SolarRed兼容幾乎所有常用的電泳緩沖溶液。
(3) 如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關(guān),請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
(4) 此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
(2) H2OSolarRed 10,000× 儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成染色液。(例如將15μL SolarRed 10,000× 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O)
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.510%丙烯酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min1h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長。

注意事項(xiàng):
(1) 用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。
(2) 3×SolarRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直用完。

在使用核酸染料時(shí)建議合理的佩戴手套、口罩、護(hù)目鏡等護(hù)具,并在符合要求的環(huán)境下進(jìn)行造作,避免核酸染料對操作者的皮膚和呼吸系統(tǒng)造成影響。不小心接觸皮膚后應(yīng)該立刻清洗,并妥善處理廢棄物。

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