化工儀器網(wǎng)技術文章
全自動組織研磨機破碎酵母細胞實驗-上海凈信
閱讀：2245 發(fā)布時間：2017-7-21驗地點：中科院生物物理所生物大分子國家重點實驗室
用戶：常文瑞組
實驗方法
1、破碎前的準備：
0.1g菌體（本實驗以0.1g菌體為例）；
直徑3號陶瓷珠；
研磨機（選用品牌上海凈信科技TS-24）；
預處理好的2ML研磨管；
模塊冷凍。
2、研磨：
0.1g菌體，5000r/min離心1 min后去上清，加入等體積的玻璃珠，加入0.5ML PBS溶液，放入預先冷凍好的模塊中，放入上海凈信科技的研磨機中，調(diào)整頻率為60Hz，震蕩時間60s.
注：破菌效率隨著液體體積的增加而增加，液體體積達到100ul時開始達到zui大破菌效率。
附：陶瓷珠回收，以下是方法：
1、將含陶瓷珠的EP管，放置在大燒杯中，用自來水中浸泡2－3天。
2、用鑷子將陶瓷珠和細胞碎片等全部抖落到燒杯中。靜置待玻璃珠沉淀后，輕輕將上面懸浮的細胞碎片倒掉，在加水重懸陶瓷珠。
3、重復步驟2，4－5次直到所有的細胞碎片都去除干凈。
4、加入適量的濃硝酸（將陶瓷珠全部覆蓋即可），浸泡過夜。
5、去離子水洗三次，置烘箱中干燥即可。