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waters色譜柱供應商講解色譜柱常見毛病
waters色譜柱供應商講解色譜柱常見毛病
1.柱壓過高
為什么柱壓會過高？
1)微粒堵塞（樣品、流動相、密封墊）
2)柱床膨脹
3)不可逆吸附
4)細菌生長
2.柱效低
為什么柱效低？
1)色譜柱被污染
2)過濾片部分堵塞（樣品、流動相或密封墊的細小顆粒造成的堵塞）
3)色譜柱內(nèi)的死體積
3.色譜柱維修/再生——物理阻塞
1)在安裝柱前后測試壓力差
2)如果柱壓太高，反裝色譜柱，并用10-20倍體積的流動相沖洗色譜柱，監(jiān)測壓力變化
3)若出現(xiàn)襯墊（如：蛋白凝聚、細胞物、聚合物）設法用相應的可溶性溶劑
4)若仍無效，應考慮更換濾片
5)柱頭有塌陷，用填料修補
4.實驗的重復性差
1)色譜柱被污染
2)流動相pH值及組成不合適造成鍵合相流失
3)樣品溶劑不同或樣品本身不穩(wěn)定
5.回收率低，不出峰
1)“不可逆”吸附
2)固定相過強或流動相過弱
3)非特異性吸附
6.色譜柱以外的因素
1)“柱效”問題，不一定是色譜柱問題
2)儀器問題：連接不好造成死體積
3)流動相問題：色譜柱未平衡好
4)進樣量太大
5)不同公司產(chǎn)品，其接頭不同。處理不當時，會造成：色譜峰展寬（死體積）使柱效下降或滲漏。解決方法：自制相應的轉(zhuǎn)換接頭；使用“通用型”接頭（椎箍及螺母）
6)系統(tǒng)反壓問題：
阻尼器堵塞
進樣器堵塞
管路或連接口堵塞
在線過濾器不干凈
保護柱
7)壓力傳感器不準確
8)流速是否錯誤