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waters色谱柱供应商讲解色谱柱常见毛病
waters色谱柱供应商讲解色谱柱常见毛病
1.柱压过高
为什么柱压会过高？
1)微粒堵塞（样品、流动相、密封垫）
2)柱床膨胀
3)不可逆吸附
4)细菌生长
2.柱效低
为什么柱效低？
1)色谱柱被污染
2)过滤片部分堵塞（样品、流动相或密封垫的细小颗粒造成的堵塞）
3)色谱柱内的死体积
3.色谱柱维修/再生——物理阻塞
1)在安装柱前后测试压力差
2)如果柱压太高，反装色谱柱，并用10-20倍体积的流动相冲洗色谱柱，监测压力变化
3)若出现衬垫（如：蛋白凝聚、细胞物、聚合物）设法用相应的可溶性溶剂
4)若仍无效，应考虑更换滤片
5)柱头有塌陷，用填料修补
4.实验的重复性差
1)色谱柱被污染
2)流动相pH值及组成不合适造成键合相流失
3)样品溶剂不同或样品本身不稳定
5.回收率低，不出峰
1)“不可逆”吸附
2)固定相过强或流动相过弱
3)非特异性吸附
6.色谱柱以外的因素
1)“柱效”问题，不一定是色谱柱问题
2)仪器问题：连接不好造成死体积
3)流动相问题：色谱柱未平衡好
4)进样量太大
5)不同公司产品，其接头不同。处理不当时，会造成：色谱峰展宽（死体积）使柱效下降或渗漏。解决方法：自制相应的转换接头；使用“通用型”接头（椎箍及螺母）
6)系统反压问题：
阻尼器堵塞
进样器堵塞
管路或连接口堵塞
在线过滤器不干净
?；ぶ?br /> 7)压力传感器不准确
8)流速是否错误