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人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒实验原理

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产品型号ELISA试剂盒购买

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更新时间:2018-08-31 20:05:59浏览次数:288次

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货号:WTA3709,产品名称:人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒实验原理,规格:48T/96T,蔚霆生物公司致力于为生化试剂行业用户提供ELISA试剂盒、标准品,对照品,生物试剂,科研抗体,生物耗材等。品种多,质量好,灵敏度高,价格实惠。我们真诚期待与您的合作!详情请咨询在线客服

货号:WTA3709,产品名称:人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒,英文名称:Human Interleukin 8,IL-8 ELISA KIT,规格:48T/96T

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ELISA试剂盒的包被条件与封闭
包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定??固搴偷鞍字士乖话悴捎胮H9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过夜,37℃中保温2小时被认为具有同等的包被效果。包被的较适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为100ng/ml-20ug/ml。
    封闭(blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程??乖蚩固灏皇彼玫呐ǘ冉系?,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙,封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥在ELISA其后的步骤中干扰物质的再吸附。封闭的手续与包被相类似。较常用的封闭剂是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的。脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂,其最大的特点是价廉,可以高浓度使用(5%)。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用,但由于奶粉的成份复杂,而且封闭后的载体不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。 
封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤*,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中,封闭一般是不可少的(见2.2.2)。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月。 

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