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小鼠脑钠素/脑钠尿肽 (BNP) 酶联免疫吸附测定试剂盒
(小鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA Kit)
检测原理:
本试剂盒采用竞争ELISA法。用BNP抗原包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的BNP与包被的BNP竞争生物素标记的抗BNP单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,BNP浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线求出标本中BNP的浓度。
标本收集:
血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
血浆:抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。
其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测
标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,6个月内进行检测,4℃保存的应在1周内进行检测。
如果样本中检测物浓度高于标准品zui高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
试验所需自备物品:
酶标仪(450nm波长滤光片)
高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水
吸水纸
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