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上海信帆生物技术有限公司所出售的“小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B（MMP-9/Gelatinase B）ELISA Kit“提供免费代测服务，我们会以优质的产品，低廉的价格来服务于每一个新老客户，咨询。

所有产品仅供科研使用，不能用于食用和医疗等

Chinese Name/中文名	小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B（MMP-9/Gelatinase B）ELISA Kit
English Name/英文名	Mouse matrix metalloproteinase 9//Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit
Catalog Number/目录号
Organism/种属	小鼠
Packing/规格	96T/Kit（812strips）/ 48T/Kit（86strips）
Detection Range/检测范围	0.31-20ng/mL
Sensitivity/灵敏度	0.19ng/mL
Method/检测方法	Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA
Sample Type/样品类型	Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品
Other Names/其他名称

小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B（MMP-9/Gelatinase B）ELISA Kit

问题1：如果我们检测的样本是组织样本，请问应该选用什么来组织匀浆,浓度是多少?
答：一般我们试剂盒的组织匀浆，都是按照10%进行匀浆,即1g组织加9ml的匀浆液，匀浆液可以选取sheng理盐水，也可以选取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol.
问题2：请问我订购了你们的试剂盒，但是样本是分批次收集的，我可以分批次实验吗。
答：可以的，我们的试剂盒横条是可拆卸的，试剂盒使用之后放到2-8度冰箱保存，下次可以继续使用，但是建议是拆封之后一个月内用完。
问题3：请问各种标本的处理方式，你可以发给我一下吗？
答：当然可以。标本要求如下：
在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
5.培养细胞：检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
6.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂，用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
8.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

组成及试剂配制

1.酶联板：两块（96孔）

2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1,600 pg/ml，将其稀释为400 pg/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别稀释成400 pg/ml，200 pg/ml，100 pg/ml，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 pg/ml，6.25 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。如配制200 pg/ml标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 400 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3.样品稀释液：1×20ml。

4.检测稀释液A：1×10ml。

5.检测稀释液B：1×10ml。

6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。

8.底物溶液：1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10.终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

11.覆膜：5张

12.使用说明书：1份

自备物品

1.酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）

2.微量加液器及吸头，EP管

3.蒸馏水或去离子水，全新滤纸

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