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上海信帆生物科技有限公司
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TUNEL檢測(cè)服務(wù)(細(xì)胞凋亡)

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更新時(shí)間:2024-10-15 09:20:17瀏覽次數(shù):2186次

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TUNEL是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確的反應(yīng)細(xì)胞凋亡Z典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞凋亡測(cè)定,并可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞,靈敏度遠(yuǎn)比一般的組織化學(xué)和生物化學(xué)測(cè)定法要高,因而在細(xì)胞凋亡的研究中已被廣泛采用。 TUNEL檢測(cè)服務(wù)(細(xì)胞凋亡)

所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等

                                                     

 TUNEL檢測(cè)服務(wù)(細(xì)胞凋亡)

簡(jiǎn)介
TUNLE即原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)。凋亡細(xì)胞的DNA雙鏈斷裂或一條鏈出現(xiàn)缺口,產(chǎn)生一系列3′-OH末端,在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)作用下,將脫氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3′末端,從而進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè)。TUNEL是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確的反應(yīng)細(xì)胞凋亡zui典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞凋亡測(cè)定,并可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞,靈敏度遠(yuǎn)比一般的組織化學(xué)和生物化學(xué)測(cè)定法要高,因而在細(xì)胞凋亡的研究中已被廣泛采用。

 

 TUNEL檢測(cè)服務(wù)(細(xì)胞凋亡)的原理: 

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè),可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?;蚪MDNA斷裂時(shí),暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標(biāo)記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè),這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。

TUNEL檢測(cè)(石蠟切片)

取下適當(dāng)?shù)男迈r的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與組織塊體積比在10:1和20:1之間,4攝氏度保存運(yùn)輸;

TUNEL檢測(cè)(冰凍切片)

取下的新鮮組織應(yīng)立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用干冰運(yùn)輸,固定好的切片應(yīng)于-80或者-20度保存,并盡快用于檢測(cè);

TUNEL檢測(cè)(細(xì)胞爬片)

細(xì)胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩沖液4度保存運(yùn)輸,盡快用于檢測(cè);

 

熒光法需要先拍一張凋亡熒光圖,再拍一張?jiān)蝗竞藞D,再合并圖層,zui終我們提供的為三張熒光圖片。

 

 

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