信帆生物新品上市：神经肽Y 放免代测服务供应！

神经肽Y 放免药盒操作说明书
NPY RIA KIT
神经肽Y(Neuropetide NPY)是一种含有36 个氨基酸残基的多肽。广泛分布于哺乳动物的中
枢神经系统。NPY 可收缩血管，升高血压，对心脏表现为负性肌力作用。zui近有作者证实血小
板有合成NPY 的能力。NPY 含量与应激反应程度有关，当出血性休克时，NPY 释放增加对维
持全身血压稳定和调节器官血流量具有重要的代偿作用。研究各种病理状态血浆及血小板NPY
含量与释放的改变及其病理生理意义，对心脑血管疾病的防治具有广阔的研究前景。
测定盒组成：
1、缓冲液一瓶。
2、分离剂（第二抗体）一瓶。
3、NPY 抗体一瓶，用前加ml 缓冲液稀释。
4、NPY 标记一瓶，用前加ml 缓冲液稀释。
5、NPY 标准品五瓶：用前每瓶加ml 缓冲液稀释33、100、300、600、1200pg/ml。
6、抑肽酶一瓶。
7、10%EDTA.Na2 一瓶。
样品收集：
1、取静脉血3ml 注入含10%EDTA.Na2 40ul 和抑肽酶10ul（含100U/ml 以上）的试管中，
混匀4℃，3000 转/分离心10 分钟，分离血浆（溶血样品影响测定结果）。如需要可分装2-3
份保存，放-20℃可保存2 个月，在-70℃以下可存放半年。测定前，使样本置于室温或冷水中
复融，再次4℃，3000 转/分离心5 分钟，取上清测定。
2、组织样品的处理：取出活组织，吸去血迹，称重，放入0.2mol/L 1N HAC 1ml 中，然后
在100℃水浴中煮沸10 分钟，匀浆。4℃，3000 转/分离心15 分钟，取上清放-20℃以下保存，
测定时用PBS 五倍以上稀释，以调节PH 值。另外，每种组织的样品非特异结合（U0）可能有
差异，每份标本zui单独做一个U0。取组织的重量视不同组织而异。
3、血浆样品处理：实验结果发现：有少数患者可能由于使用某些药物或个体差异，出现血浆
蛋白对抗原抗体反应的影响，测定NPY 值偏低，甚至为零。为排除样品中蛋白质的干扰，可采
用简易酸性乙醇提取法，
具体步骤如下：
取血浆0.5ml+1ml 酸性无水乙醇（ 100ml 无水乙醇+冰乙酸1.2ml），放振荡器上振荡1min，4℃，
3500rpm/15min 离心15min，将上清液倒入青霉素瓶，在45℃水浴锅上蒸干（可将水浴锅温
度调到80℃左右，锅口上放一铝板，铝板上温度约40~45℃，将青霉素瓶置于铝板之上），大
约需24 小时样品可以*干燥，干燥后将青霉素瓶加盖，封口，放-20℃保存。
测定前，每瓶加PH7.4 PBS 0.5ml 溶解，混匀，倒入塑料管中，放-20℃ 4h 以上至样品*
冻结，然后取出放置4℃*溶解，取上清200ul 测定用。
注：从4℃取出后，一定要轻拿轻放，千万不要再振荡混匀，不要在室温放置过久，现加现
取。
测定方法：本实验采用非平衡法，取聚苯乙烯编号，按下表操作。
NPY RIA 操作程序（单位：ul）
————————————————————————————
试剂T NSB S0 S1~S5 样品
————————————————————————————
缓冲液—— 300 200 —— ——
标准品—— —— —— 200 ——
样品—— —— —— —— 200
抗体—— —— 100 100 100
————————————————————————————
摇匀，4℃ 48 小时
————————————————————————————
125I-NPY 100 100 100 100 100
————————————————————————————
摇匀，4℃ 24 小时
————————————————————————————
分离剂—— 500 500 500 500
————————————————————————————
混匀，室温放置20 分钟，4℃3500 转/分离心25 分钟，去上清，测定沉淀cpm 值。
结果计算：
以N/T、B/T 计算NSB、S0 结合百分率，以B/B0 计算标准及待测物结合百分率，
在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注：测兔标本时，应改用20%PEG500ul/管分离。同时向NSB、S0、S1~S5 管
加Υ球蛋白液100ul/管；U、U0 管加缓冲液100ul/管。
本试剂盒主要技术参数：
特异性：抗血清与7 种常见的多肽类化合物的交叉反应<1%。
灵敏度：<33pg/ml。可测范围：33~1200 pg/ml。
精密度：批内CVW<10%，批间CVb<15% 。
有效期：本药盒4~8℃，保存有效期35 天。
正常参考值：145.1±44.1 pg/ml。