亚洲精品综合日韩中文字幕网站_精品综合久久久久97_中文在线天堂网www_久久精品免费一区二区三区_91久久国产综合精品女同国语_久久资源总站在线国产成人

上海信帆生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第13年

13764793648

基質(zhì)金屬蛋白酶/明膠酶譜法試劑盒
ELISA試劑盒
干擾物質(zhì)
血清及相關(guān)類產(chǎn)品
生化法試劑盒
實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)項(xiàng)目
質(zhì)控品/校準(zhǔn)品
RIA免疫檢測(cè)
品牌生化試劑
檢測(cè)試劑盒
抗體和抗原
胰島素(Insulin)試劑盒
補(bǔ)體蛋白試劑盒
腫瘤壞死因子elisa試劑盒
白介素Elisa試劑盒
化學(xué)溶液
檢測(cè)試劑
GIBCO培養(yǎng)基
商城
染色試劑
試劑
生化指示劑
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
科研用二抗
動(dòng)物紅細(xì)胞懸液
生物試劑
染色液
科研細(xì)胞
生化試劑
生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)
細(xì)胞因子及重組蛋白
合成多肽

細(xì)胞凍存液的原理及操作!

時(shí)間:2021/11/8閱讀:5771
分享:

細(xì)胞凍存液的作用及操作!

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。
原理:

細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成,減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷,從提高細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時(shí)低溫保護(hù)劑獲得1:10~1:20的稀釋,稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜,這是因?yàn)楫?dāng)?shù)蜏乇Wo(hù)劑稀釋10~20倍以后,該濃度一般不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成毒性損傷。

操作步驟:

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;

2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。

3. 去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái);

4. 離心1000rpm,5min;

5. 去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;

8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。

注意事項(xiàng):

1.從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但最好為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。

2.將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作,以免凍傷;

3.最好用新配制的培養(yǎng)液。



會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
惠安县| 桑日县| 北海市| 井陉县| 酉阳| 亳州市| 保靖县| 临夏县| 巴彦县| 青岛市| 和林格尔县| 宣恩县| 东乡县| 应城市| 兴文县| 娱乐| 峨眉山市| 巴楚县| 白水县| 西华县| 连云港市| 临漳县| 巴南区| 石楼县| 崇仁县| 和林格尔县| 晋州市| 邵阳县| 大冶市| 潮安县| 林西县| 河南省| 安远县| 科尔| 永定县| 漳平市| 绵竹市| 紫云| 长沙市| 原阳县| 德昌县|