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上海信帆生物科技有限公司
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瓊脂糖凝膠CL-4B現(xiàn)貨供應(yīng)-上海信帆生物

時(shí)間:2020/4/29閱讀:1700
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瓊脂糖凝膠CL-4B現(xiàn)貨供應(yīng)-上海信帆生物

瓊脂糖凝膠CL-4B

規(guī)格:10ml/50ml/100ml/500ml

產(chǎn)品說(shuō)明

瓊脂糖凝膠 CL-4B 是在瓊脂糖凝膠 4B 的基礎(chǔ)上通過(guò)交聯(lián)使微球的剛性增強(qiáng),理化性能提高,有利用于工業(yè)

生物試劑。該介質(zhì)用于生物大分子的凝膠層析。本品呈白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。本產(chǎn)品具有很

高的化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、較好的機(jī)械性能、可多次重復(fù)使用等特點(diǎn),非特異性吸附低,回收率高,可用有機(jī)溶

劑及 1~2mol/L NaOH 在位清洗,適用于工業(yè)規(guī)模生物試劑,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多

肽的凝膠色譜純化。

操作步驟:(僅供參考)

1、裝柱

凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿(mǎn)

凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于 60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。

以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。

1)讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

2)選擇一根一定直徑的柱子,長(zhǎng)約 30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的 1.15 倍),清洗掉

20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=31 的比例)配成勻漿。

3)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無(wú)氣泡。

4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開(kāi)柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉

降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。

5)打開(kāi)蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的 1.33 倍的流速流過(guò),使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子,到柱床穩(wěn)定。

6)好用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。

項(xiàng)目

說(shuō)明

基質(zhì)

4%交聯(lián)瓊脂糖

排阻極限

6×104~2×107 (球蛋白)

形狀

球形

粒徑

45~165 μm

高流速

30 cm/h*

耐熱

pH7 水中 12020min

耐壓

0.025 MPa

pH 穩(wěn)定性

3~13(長(zhǎng)時(shí)間)2~14(短時(shí)間,在位清洗)

化學(xué)穩(wěn)定性

可耐 8mol/L 尿素、6mol/L 鹽酸胍;可耐有機(jī)溶劑,如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、

丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈

檢測(cè)條件

層析柱 10mm×300mm *柱床高 15cm,25℃,流動(dòng)相為 0.1mol/LNaCl2、平衡:讓緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,到流出液電導(dǎo)和 pH 不變。

3、上樣:

1)樣品用緩沖液配制,要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理,再上樣。

2)介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。

3)上樣體積約為柱體積的 1~2%,越小分離越好。

4、洗脫:用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

5、再生:一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。

6、在位清洗

1)對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用 2M Nacl 去除。

2)對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類(lèi),可用 1M NaOH 去除。

3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類(lèi)等,用 4~10 倍柱體積的 70%乙醇或 30%異丙醇清洗,但要注意有機(jī)溶劑

的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。

清洗完畢后,用至少 3 倍緩沖液平衡柱子。

7、去熱源

0.5M 的氫氧化鈉清洗柱子 5~6 小時(shí)或用 0.1M 的氫氧化鈉 24 小時(shí)?;蛴靡韵路椒ú襟E去除:

12 倍柱體積的 70%乙醇;

22 倍柱體積 50mM Tris-HCl pH7.5

31 倍柱體積 4M 尿素;

43 倍柱體積的 Tris 緩沖液+0.1M NaCl;

以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。

8、 消毒:0.5~1M NaOH 室溫下洗 8~10 倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。

注意事項(xiàng)

在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,要避免柱子流干,氣泡進(jìn)入

產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在 4~25℃(保存溶液為 20% 乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。

用過(guò)的柱子貯存在 4℃(20% 乙醇)。

本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸;避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。

保質(zhì)期:5 年。

瓊脂糖凝膠CL-4B現(xiàn)貨供應(yīng)-上海信帆生物

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