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上海信帆生物科技有限公司
中級會(huì)員 | 第13年

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細(xì)胞樣本在做實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測的時(shí)候需要多少數(shù)量的細(xì)胞呢

時(shí)間:2018/8/1閱讀:6514
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細(xì)胞樣本在做實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測的時(shí)候需要多少數(shù)量的細(xì)胞呢

 

做實(shí)時(shí)熒光定量PCR細(xì)胞樣本寄送量:


細(xì)胞樣本:細(xì)胞數(shù)107個(gè)以上

 

上海信帆生物提供實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測技術(shù)服務(wù),服務(wù)內(nèi)容包括:

 

RNA提取,逆轉(zhuǎn)錄,引物設(shè)計(jì)、合成及調(diào)試,相對定量PCR分析

 

RNA質(zhì)量檢測

a)測定樣品在260nm和280nm的吸收值確定RNA的質(zhì)量(儀器ND5000超微量紫外可見分光光度儀),不同樣品OD值測定。

b)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,確定抽提RNA的完整性和DNA的污染情況,不同樣品RNA電泳圖譜。

 

細(xì)胞樣本在做實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測的時(shí)候需要多少數(shù)量的細(xì)胞呢

 

關(guān)于實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果分析的幾個(gè)問題:

麻煩問一下大家,如何分析real time PCR的結(jié)果,用的是SYBR Green的方法,做相對表達(dá)量的分析。結(jié)果怎么作圖怎么描述?升高或者降低的倍數(shù)達(dá)到多少才有意義呢?

 

簡單說就就是運(yùn)用2-deltadeltaCT運(yùn)算后的結(jié)果和作圖。不在于升高或降低多少倍數(shù)才有意義,而是統(tǒng)計(jì)是不是有意義。

 

為什么合成的引物做不加摸板的對照也能擴(kuò)增出目的條帶,而內(nèi)參用同樣體系就沒有呢?

 

引物被污染。

 

3實(shí)時(shí)定量PCR,熒光定量PCR,實(shí)時(shí)熒光定量PCR,real-time PCR,這些是不是同一個(gè)概念

 

是一個(gè)概念。

 

細(xì)胞樣本在做實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測的時(shí)候需要多少數(shù)量的細(xì)胞呢

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