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當(dāng)前位置：> 供求商機(jī)> Cell Counting Kit（CCK-8/WST-8）試劑盒
所在地：YEASEN
貨物所在地：上海上海市
更新時(shí)間：2025/3/12 21:00:48
訪問(wèn)次數(shù)：297
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檢測(cè)原理：
◆ Cell Counting Kit簡(jiǎn)稱CCK8,（CCK-8/WST-8）試劑盒，是一種基于WST-8（化學(xué)名：2-（2-甲氧基-4-硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。
◆ WST-8屬于MTT的升級(jí)產(chǎn)品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長(zhǎng)處測(cè)定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
◆ CCK法應(yīng)用非常廣泛，如藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性檢測(cè)等。
CCK方法的優(yōu)勢(shì)：
◆ 表1 CCK法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)比較
| MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK法 | |
| 甲臜產(chǎn)物的水溶性 | 差（需加有機(jī)溶劑溶解再檢測(cè)） | 好 | 好 | 好 |
| 產(chǎn)品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
| 使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 即開(kāi)即用 | 即開(kāi)即用 |
| 檢測(cè)靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
| 檢測(cè)時(shí)間 | 較長(zhǎng) | 較短 | 較短 | zui短 |
| 檢測(cè)波長(zhǎng) | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
| 細(xì)胞毒性 | 高，細(xì)胞形態(tài)*消失 | 很低，細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低，細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
| 試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 |
| 批量樣品檢測(cè) | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
| 便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
◆ 酚紅和血清對(duì)CCK法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾；
◆ 細(xì)胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到*測(cè)定時(shí)間。
CCK法的操作步驟（更多內(nèi)容請(qǐng)見(jiàn)說(shuō)明書(shū)）：
實(shí)驗(yàn)一：細(xì)胞活性檢測(cè)
1、在96孔板中接種細(xì)胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（
2、向每孔加入10 μL CCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù)）。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)。
4、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm處的吸光度。
5、若暫時(shí)不測(cè)定OD值，可以向每孔中加入10 μL
實(shí)驗(yàn)二：細(xì)胞增殖-毒性檢測(cè)
1、在96孔板中配置100μL的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)（
2、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（例如：6、12、24或48小時(shí)）。
4、向每孔加入10μL CCK溶液（注意不要再孔中生成氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù)）。
5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)。
6、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm處的吸光度。
7、若暫時(shí)不測(cè)定OD值，可以向每孔中加入10 μL
注意：如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加CCK之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉藥物影響。當(dāng)然藥物影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。
活力計(jì)算：
細(xì)胞活力*（％）=[A（加藥）-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）] ×100
A（加藥）：具有細(xì)胞、CCK溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和CCK溶液而沒(méi)有細(xì)胞的孔的吸光度
A（0加藥）：具有細(xì)胞、CCK溶液而沒(méi)有藥物溶液的孔的吸光度
*細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力
保存條件：
產(chǎn)品報(bào)價(jià)：
| 貨號(hào) | 名稱 | 產(chǎn)地 | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià)（元） | 庫(kù)存 |
| QF0025 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 100次/1ml | 150 | 是 |
| QF0026 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 500次/5ml | 480 | 是 |
| QF0027 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 1000T/10ml | 920 | 是 |
| QF0028 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 3000T/30ml | 1833 | 是 |
| QF0029 | CCK-8（wst-8） | YEASEN | 10000T/100ml | 5122 | 是 |
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