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產品說明：真核表達篩選用抗生素，可以用于篩選表達特定抗性基因的穩(wěn)定細胞株。篩選哺乳動物細胞，推薦起始篩選濃度為400微克/毫升；篩選植物細胞，推薦起始篩選濃度為10微克/毫升；篩選酵母，推薦起始濃度為500微克/毫升。根據起始濃度的效果可以再適當升高或降低G-418的使用濃度。
分子式：C20H 40N4O10·2H2SO4
分子量：692.71
CAS＃：108321-42-2
外觀：白色粉末
溶解性：可溶于水、甲醇、緩沖液和培養(yǎng)基。溶解后，0.22μm過濾除菌，分成小包裝，4℃可保存12個月，-20℃保存時間更長。zui常用的儲存液使用100mM HEPES（pH7.3）配制，濃度為50mg/ml。使用HEPES配制的好處是：加入儲存液不會改變培養(yǎng)體系的pH值。
儲存條件：2-8℃
G418溶液的配制
配的時候就是用配好的HEPES溶G418，然后過濾，不用高壓滅菌了，配好后分裝，-20度保存，用的時候取一管放4度。
ddH2O 490ml
Nacl
Na2HPO4-12H2O
Kcl
Glu
HEPES
用氫氧化鈉調PH至7.3 ，定容至500ml
G418貯存液（50mg/ml）的配制
以下為細胞篩選的常用步驟：僅僅作為參考
1.G418的配制：取
2.細胞培養(yǎng)：取待測培養(yǎng)細胞，制備成細胞懸液，按等量接種入多孔培養(yǎng)板中，培養(yǎng)6小時左右開始加藥。
3.制備篩選培養(yǎng)基：在100ug/ml~1000ug/ml范圍內確定幾個梯度，比如先做個100ug/ml、400ug/ml、800ug/ml、1000ug/ml，按梯度濃度用培養(yǎng)基稀釋G418制成篩選培養(yǎng)基。
4.加G418篩選：吸除培養(yǎng)孔中培養(yǎng)基，PBS洗滌一次，每孔中加入不同濃度的篩選培養(yǎng)基。
5.換液：根據培養(yǎng)基的顏色和細胞生長情況，每3~5天更換一次篩選培養(yǎng)基。方法同4.
6.確定*篩選濃度：在篩選10~14天內能夠殺死所有細胞的zui小G418濃度即為*篩選濃度。在*輪就篩選出*G418濃度的可能性不大，zui有可能的是出現這種情況：用某一濃度G418的量在篩選14天后還不能殺死細胞，而用下一個梯度的 G418的量在10天前就看不到活細胞了。假如是400ug/ml不能殺死細胞，而800ug/ml在第5天就把所有細胞都殺死了，則可以再用500ug /ml、600ug/ml、700ug/ml進一步篩選，以確定*篩選濃度！心得：由于特性明確的細胞系G418的*用量還是比較穩(wěn)定的，所以有時候不需要在這么大范圍內進行篩選。比如說你要轉染NIH3T3細胞，現在我告訴你我測試過NIH3T3細胞對G418的敏感性，我用的篩選濃度是200 ug/ml，這時你就可以做150ug/ml、200ug/ml、 300ug/ml三個濃度進行篩選。
通過預實驗確定了*篩選濃度后，就可以做穩(wěn)定轉染了。
a 轉染：轉染后培養(yǎng)24小時或者更長，到細胞增長接近匯合時按1:4密度傳代，繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞密度增至50%~70%匯合時；
b 加G418：去掉培養(yǎng)液，PBS洗一次，加入按*篩選濃度配制好的G418篩選培養(yǎng)基。
c 換液：根據培養(yǎng)基的顏色和細胞生長情況，每3~5天更換一次篩選培養(yǎng)基。當有大量細胞死亡時，可以把G418濃度減半維持篩選。 篩選10~14天后，可見有抗性的克隆出現，停藥培養(yǎng)，待其逐漸增大后；
d 挑單克?。褐苽浼毎麘乙?，細胞計數，用培養(yǎng)基稀釋細胞到1個/10ul。在96孔板中加入培養(yǎng)基150ul/孔，再加入細胞懸液10ul/孔。待其逐漸增大后轉入到48孔中增殖。
e 單克隆鑒定：細胞大量擴增后，提取總RNA,做RT-PCR檢測目的基因是否存在。
產品報價：
| 貨號 | 名稱 | 產地 | 規(guī)格 | 報價（元） | *（元） | 庫存 |
| | G418 | Mpbio | | 2298 | 345 | 是 |
| | G418 | Mpbio | | 5895 | 1450 | 是 |
| 99261ES03 | G418 | YEASEN | | 320 |
| 是 |
| 99261ES05 | G418 | YEASEN | | 1250 |
| 是 |
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