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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 100 T |
|---|---|---|---|
| 货号 | 50108ES60 | 应用领域 | 生物产业,制药/生物制药 |
产品介绍
过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒
产品描述
过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒Catalase Assay Kit是一种简单快速、可通过测试吸光度来检测动物血清、血浆、组织以及全血、红细胞、培养细胞、培养液中的过氧化氢酶（CAT）的活力。过氧化氢酶（CAT）催化H2O2分解为水和氧气，当加入钼酸铵后，反应迅速终止，剩余的H2O2与试剂盒中的钼酸铵发生络合反应，得到淡黄色的产物。这个黄色产物的最大吸收波长是405 nm 。所以，可以通过检测405 nm处的吸光度，来测定样品中的过氧化氢酶（CAT）的活力。
羟基自由基（OH-）是很活泼的活性氧，它能与细胞内的许多有机物、核酸、有机酸等等发生氧化反应，破坏性强。过氧化氢酶（CAT）广泛分布在血清、血浆、红细胞等中，能分解活性氧，?；は赴馐芷苹担蚨舛ü趸饷福–AT）的活力至关重要。
产品组分
产品编号 | 产品组分 | 产品规格 |
50108-A | 试剂一 | 100 mL |
50108-B | 试剂二 | 10 mL |
50108-C | 试剂三 | 7 g |
50108-D | 试剂四 | 10 mL |
运输与保存
冰袋运输；2℃～8℃避光保存即可；保质期6个月。
注意事项
1）加入试剂一和试剂二之前，要进行37 ℃预热；
2）试剂三溶解、保存后，使用前有沉淀，直接取上清即可，不影响实验结果；
3）当天冷时试剂四会凝固，使用前37 ℃水浴加热至透明即可；
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5）本产品仅作科研用途！
使用说明
1.溶解试剂三：向试剂三（显色粉剂）中加入100 mL的双蒸水溶解；放入2℃～8℃冰箱避光保存（如果底部有不溶的粉末沉淀，直接取上清即可，不影响实验结果）
2.预热：实验之前，先将试剂盒中的试剂一和试剂二放在37 ℃水浴锅中预热10～20 min，以备后用；
3.加样品，检测吸光度：
A.血清、血浆样本吸光度检测：
血清、血浆样本 | ||
实验组 | 对照组 | |
试剂一（37 ℃预热） | 1.0 mL | 1.0 mL |
试剂二（37 ℃预热） | 0.1 mL | 0.1 mL |
血清/血浆 | 0.1 mL | |
混匀后，在37 ℃中准确加热1min（注意：一定要准确加热反应1min），然后加试剂三和试剂四； | ||
试剂三 | 1.0 mL | 1.0 mL |
试剂四 | 0.1 mL | 0.1 mL |
血清/血浆 | 0.1 mL | |
混匀，在光径为0.5 cm，波长为405 nm处，双蒸水调零，检测吸光度。 | ||
B.全血、红细胞样本吸光度检测：
1) 1：99溶血液配置：向50 μL全血或红细胞样本中加双蒸水至5mL，混匀，放置10 min，待测；
2) 检测吸光度：
全血、红细胞样本 | |||
实验组 | 空白对照组 | 自身对照组 | |
蒸馏水 | 0.05 mL | 2.1 mL | |
1：99溶血液 | 0.05 mL | 0.05 mL | |
试剂一（37 ℃预热） | 1.0 mL | 1.0 mL | |
试剂二（37 ℃预热） | 0.1 mL | 0.1 mL | |
混匀后，在37 ℃中准确加热1min（注意：一定要准确加热反应1min），然后加试剂三； | |||
试剂三 | 1.0 mL | 1.0 mL | |
混匀，在光径为0.5 cm，波长为405 nm处，双蒸水调零，检测吸光度。 | |||
C.组织样本吸光度检测：
1) 组织匀浆液制备：按组织重量（g）：生理盐水体积（mL）=1:9的比例，在冰水浴条件下，制备成10%的组织匀浆，2500r/min离心10 min，取上清；再用生理盐水稀释到最佳取样浓度，一般稀释成：5%、2%、1%、0.5%、0.25%、0.1%等不同的取样浓度，其中小鼠肝脏匀浆取样浓度为0.25%～1%。
2) 检测吸光度：
组织样本 | ||
实验组 | 对照组 | |
试剂一（37 ℃预热） | 1.0 mL | 1.0 mL |
试剂二（37 ℃预热） | 0.1 mL | 0.1 mL |
组织匀浆 | 0.05 mL | |
混匀后，在37 ℃中准确加热1min（注意：一定要准确加热反应1min），然后加试剂三和试剂四； | ||
试剂三 | 1.0 mL | 1.0 mL |
试剂四 | 0.1 mL | 0.1 mL |
组织匀浆 | 0.05 mL | |
混匀，在光径为0.5 cm，波长为405 nm处，双蒸水调零，检测吸光度。 | ||
4.过氧化氢酶活力计算
A.血清、血浆中过氧化氢酶（CAT）活力计算（每毫升血清或血浆每秒钟分解1μmol H2O2的量为一个活力单位）
血清中过氧化氢酶活力（U/mL）=（对照组OD值－实验组OD值）×
×样本测试前稀释倍数
B.血红蛋白中过氧化氢酶（CAT）活力计算（每毫克血红蛋白每秒钟分解1μmol H2O2的量为一个活力单位）溶血液中过氧化氢酶活力（U/mgHb）=（空白对照组OD值＋自身对照组OD值－实验组OD值）×
÷血红蛋白含量（mgHb/mL）
C.组织匀浆中过氧化氢酶（CAT）活力计算（每毫克组织蛋白每秒钟分解1μmol H2O2的量为一个活力单位）
组织匀浆中过氧化氢酶活力（U/mgprot）=（对照组OD值—实验组OD值）×
÷待测样本蛋白浓度（mgprot/mL）
HB20190802
