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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 10ml |
|---|---|---|---|
| 货号 | 40210ES10 | 应用领域 | 生物产业,制药/生物制药 |
产品介绍
ATP Luminescent 细胞活力检测试剂盒|ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit
产品描述
ATP是细胞内最重要的能量分子，可以用来衡量细胞新陈代谢水平，并与活细胞数目具有良好的线性关系，因此，可通过ATP含量反应活细胞的数目。本试剂盒借ATP依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应，通过化学发光信号测定细胞内 ATP含量，从而检测细胞活力或定量检测活细胞数目，灵敏度高、线性范围宽。本试剂盒兼容少量样品检测以及大量样品的高通量筛选检测。
ATP Luminescent 细胞活力检测试剂盒本试剂盒提供的发光法细胞活力检测试剂线性范围宽、灵敏度高、稳定性好。96孔板中，在100个至100,000个细胞范围内有良好的线性关系，但不同细胞的检测数量上限会有不同。此外，操作简单，试剂盒中提供的检测试剂为即用型，读数稳定，检测速度快，完成检测仅需约10 min，无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液。相比于其他常见的细胞活力测定方法，如Calcein-AM、CCK-8等，发光法细胞活力检测更加简单快捷。
运输和保存方法
冰袋运输。-20 oC避光保存，有效期3年。
注意事项
1）试剂中含有荧光素酶，反复冻融会影响其活性。建议分装后置于-20 ℃避光保存。
2）试剂及细胞样品使用前均需平衡至室温，以避免酶催化效果的影响。
3）药物含量较高时可能会干扰荧光素酶反应，从而影响化学发光信号。建议设置含有药物的细胞培养液照孔以排除溶剂的干扰。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5）本产品仅供科研使用。
使用方法
一、细胞培养
使用适合进行化学发光检测的96孔板，每孔接种100 μL细胞（根据培养时间确定初始接种的细胞密度，检测时每孔细胞数量不宜超过10万个），同时设置不含细胞的培养液的孔作为阴性对照。37 ℃，5 % CO2培养细胞。也可以设置细胞的浓度梯度，以得到最佳的实验结果。根据需要在合适的时间加药处理细胞。
二、（可?。?/span>ATP标准曲线的制作
把自备的ATP标准溶液用 PBS稀释成适当的浓度梯度，96孔板每孔加入100 μL的标准品。
三、细胞活力检测
1. 融解冻存的发光法检测试剂，并平衡至室温；
2. 取出细胞培养板，室温平衡10 min；
3. 96孔板每孔加入100 μL检测试剂（由于孔的边缘效应，可能会导致发光信号不稳定，不建议在边缘铺板）；
4. 室温振荡2 min，以促进细胞的裂解；
5. 室温放置10 min，使发光信号趋于稳定；
6. 使用多功能酶标仪进行化学发光检测，检测波长560 nm。根据仪器要求设置相应的参数，每孔的检测时间一般为0.25-1 s，具体需根据仪器的检测灵敏度进行适当的调整；
7. 根据化学发光读数计算细胞的相对活力，或根据ATP标准曲线计算ATP含量从而得出细胞的相对活力。
【注】：检测效果因细胞的种类不同而异，对于一些ATP含量特别高的细胞，在细胞数量达到100,000以上可能会出现化学发光读数继续升高，但丧失线性关系。
HB220913
