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产品详细描述
LSM淋巴细胞分离液
LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM
用途：
用于体外分离外周血淋巴细胞，也可以从其他来源中分离单核细胞，包括脐带血细胞和骨髓细胞。
方法概述：
早期分离白细胞的方法，会用一种化合物混合血液。此化合物能够聚集红细胞，只轻微影响白细胞。通过离心，红细胞由于密度增加而聚集沉淀，同时从离心管内上层收集白细胞。
Böyum提出了一种更方便快速的分离方法，即以Ficoll®-甲泛影钠溶液为介质进行离心。稀释的血液在Ficoll-甲泛影钠溶液中分层，之后低速短时离心。红细胞和多形核粒细胞沉降到管底，单个核细胞（淋巴细胞）和血小板可以从两个分层间的分界面处收集。
许多研究者不断改进了Böyum方法，对于MP生物医学公司生产的LSM，其方法的*之处在于成功运用泛影酸钠代替了甲泛影钠。
程序原理：
去纤维蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释，在分离溶液中分层，低速离心30min。离心过程中，由于差速迁移终形成不同的细胞层。
聚集在管底的颗粒主要是红细胞和多形核粒细胞，它们通过梯度迁移至管底。由于其密度不同，淋巴细胞和其他单个核细胞（单核细胞和血小板）分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收，后进一步清洗去除血小板，LSM和血浆。
试剂：
LSM® 是一种滤膜过滤除菌的溶液，每100ml包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸钠。20℃下密度是1.0770-1.0800g/ml。
使用说明：
以下的操作步骤是初由Böyum.设计的程序中众多改良版本的一种。此程序经改良用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人体血液；对于其他物种或者其他组织的血液，改变此程序也许是有必要的。
1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2. 无菌转移3 ml LSM到15 ml离心管中。
3. 混合2 ml去纤维蛋白血液或肝素化血液 和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入含有3 ml LSM（室温）的15ml离心管中，在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400xg离心15-30min，离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞，同时可以在LSM上形成一层单核淋巴细胞，如上图所示（具体分层情况为血浆层-单个核细胞层-LSM层-RBC颗粒）。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM，并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中，室温（18-25°C）离心10分钟，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻，例如160 – 260 xg（清洗去除LSM，并降低血小板的百分比）。
8. 再用平衡盐缓冲液清洗细胞，后用适当的培养基重悬细胞。
订购信息：相当于sigma公司的Histopaque®-1077产品
名称 | 货号 | 规格 | 单价 | * |
淋巴细胞分离液（MPbio公司产品） | 0850494X | 100ML | 362元 | 280元 |
0850494 | 100ML*5 | 1587元 | 1400元 | |
相当于sigma公司的Histopaque®-1077产品 也相当于GE公司的Ficoll-Paque PREMIUM 我们公司的特点是现货，折扣大，质量更加稳定，大批量采购更优惠! | ||||
厂家说明
MP Biomedicals生物医学公司是位于美国加利福尼亚州的生命科学和生物技术厂商。2004年底成功收购Qbiogene、ICN，现在有5个大型仓库，能够及时供应各行业需求，亚洲仓库位于新加坡。它致力于生命科学领域的基础研究和探索。目前它提供55000多种产品，是世界上能全面提供生命科学产品和临床诊断产品的几家厂商之一。
