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技術(shù)文章

基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法電泳分析試劑盒產(chǎn)品說明書

閱讀:1265          發(fā)布時間:2016-6-20

主要用途

   我公司基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析試劑是一種旨在通過明膠聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法,在分離、蛋白復性、底物水解、染色等一系列步驟下,觀察并半定量深藍色背景中的無色清晰的基質(zhì)金屬蛋白酶條帶,根據(jù)分子量確定特異基質(zhì)金屬蛋白酶及其活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞萃取樣品(動物、人體、植物、昆蟲等)、培養(yǎng)上清懸液、血清和關(guān)節(jié)滑液或腦脊液基質(zhì)金屬蛋白酶-2,9,以及13等活性及其抑制劑的檢測。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便捷,敏感度高,條帶清晰,重復性好。

注意事項

  • 本產(chǎn)品為5次(45個樣品)操作 
  • 操作時,須戴手套
  • 樣品準備要點如下:
    • 必須澄清,至關(guān)重要:4℃高速離心5分鐘,速度為10000g,置于-70℃保存待測
    • 樣品中避免使用EDTA、EGTA等二價陽離子鰲和劑以及巰基乙醇和DTT等
    • 樣品中避免使用硫醇抑制劑(THIOL INHIBITOR)
    • 由于TIMP等天然抑制劑的存在,血清樣品中的基質(zhì)金屬蛋白酶活性很低,可以使用活化劑(建議使用膠原酶潛酶活化劑(APMA)-12197)
    • 如果驗證樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶,可以使用抑制劑EDTA對照
    • 避免培養(yǎng)細胞上清樣品顯示黃色,表明已經(jīng)過于酸性,須調(diào)整pH為中性方可使用
  • 膠體和膠頂配制前,須25℃預熱相關(guān)試劑
  • 電泳前注意清洗樣品孔
  • 電泳運行,注意安全
  • 染色時,避免光照

 

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