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ELISA試劑盒的包被方法
閱讀：1685 發(fā)布時(shí)間：2015-2-9目前做多的方式是采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液包被，4℃過(guò)液包被或者37℃包被2h，包被的適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化，一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml，要明確針對(duì)特定包被抗原的適包被濃度需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。
聚本乙烯載體中加入定量的蛋白質(zhì)包被液后，多數(shù)放在4℃冰箱過(guò)液，讓固相表面充分吸附，或用37℃孵育2h也可以達(dá)到同樣的吸附效果，但37℃包被2~3h與1h，兩者后測(cè)得的吸光度值相差不顯著。 蛋白質(zhì)吸附于聚苯乙烯酶標(biāo)板的動(dòng)力學(xué)研究表明： 加入包被液后1MIN, 固相上便發(fā)生吸附作用，吸附量與蛋白質(zhì)濃度， 包被時(shí)間有關(guān)。 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)濃度為5ug/mL時(shí)，包被60MIN出現(xiàn)明顯吸附，12h后吸附量不再隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加： 蛋白質(zhì)濃度為10ug/mL 和20ug/mL時(shí)， 兩者的吸附作用類似， 包被3min 便出現(xiàn)明顯吸附， 6h后吸附*， 5min 的吸附量為6min的30%