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技術(shù)文章

滬鼎生物教你凍存的原代細(xì)胞應(yīng)該如何培養(yǎng)?

閱讀:961          發(fā)布時(shí)間:2022-8-9

上海滬鼎生物凍存的原代細(xì)胞應(yīng)該如何培養(yǎng),我司以客戶為核心,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務(wù)求信譽(yù),原代細(xì)胞通過不斷改進(jìn)來提高效率,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)。


原代細(xì)胞是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學(xué)研究等。


一、凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng):

 1.將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。

 2.將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。

 3.將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。

 4.用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。

 5.打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,開蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出,這是正?,F(xiàn)象)。

 6.用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。

 7.蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。

 8.將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中。

 9.放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。 


 二、原代細(xì)胞的組織塊培養(yǎng)法:

 1.組織塊接種后的前3天,在觀察和移動(dòng)的過程中,注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動(dòng)和振動(dòng),否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會(huì)脫落飄起。

 2.加入的培養(yǎng)液不宜過多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來。

 3.當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞,它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì)影響原代細(xì)胞的生長。

 4.為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上,可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上。


我司致力于提供生命科學(xué)領(lǐng)域的服務(wù),提供原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)服務(wù)(技術(shù)指導(dǎo)、上海地區(qū)可上門取樣等),為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復(fù)勞動(dòng)的時(shí)間和精力,,讓客戶買的放心,用的安心。


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