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分枝杆菌的细胞壁内含有大量脂质包围在肽聚糖的外面, 所以分枝杆菌一般不易着色，传统的染色方法要经过加热和延长染色时间来促使其着色。分枝杆菌中的分枝菌酸与染料一旦结合后，就很难被酸性脱色液脱色，故名抗酸染色，其中代表性的是结核杆菌Ziehl－Neelsen染色法，该法是WHO推荐热染的方法。
Leagene(改良Kinyoun冷染法)属于冷染色液，无需加热，相对较抗酸热染液安全，其染色原理是在室温条件下分枝菌酸与复红结合成复合物，经复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色，该染色液较Kinyoun冷染法要浅，更适用于抗弱酸酸染色。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
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