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VX2細(xì)胞株的培養(yǎng)與操作

閱讀:559發(fā)布時(shí)間:2024-10-14

  VX2細(xì)胞株,也被稱為VX2兔間變表皮鱗癌瘤株,是一種重要的科研用細(xì)胞株。
 
  VX2細(xì)胞株特性與參數(shù):
 
  細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
 
  生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
 
  含量:通常大于1x10^6個(gè)/mL
 
  污染檢測(cè):支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
 
  培養(yǎng)基:常用EMEM培養(yǎng)基添加10%的胎牛血清(FBS),也有使用DMEM+10%FBS或89%EMEM+10%FBS+1%雙抗等配方
 
  傳代方法:傳代比例通常為1:2至1:4,傳代后兩天左右換液
 
  凍存條件:使用90%完全培養(yǎng)基+10%DMSO(或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO)進(jìn)行凍存,液氮儲(chǔ)存
 
  VX2細(xì)胞株培養(yǎng)與操作:
 
  復(fù)蘇細(xì)胞:將含有細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入培養(yǎng)基混合均勻后離心,棄去上清液,補(bǔ)加培養(yǎng)基后吹勻,然后接種至培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。
 
  細(xì)胞傳代:當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。傳代過程中需要使用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量的胰酶進(jìn)行消化,待細(xì)胞大部分變圓并脫落后加入培養(yǎng)基終止消化,然后進(jìn)行離心、重懸和接種。
 
  細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。凍存前需要棄去培養(yǎng)基,使用PBS清洗一遍后加入胰酶進(jìn)行消化,細(xì)胞脫落后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,然后進(jìn)行離心、重懸和凍存。

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