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| 供貨周期 | 一周 | 應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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植物DNA核酸免提取試劑盒（高產(chǎn)量）
試劑盒應用
本試劑盒采用zhuan利裂解液配方在10分鐘內(nèi)完成植物葉片、根、莖、花蕊、種子等的裂解、提取和純化。提取對象包括水稻、玉米、小麥、油菜等作物。整個提取過無需使用蛋白酶K等酶類制劑。提取DNA可用于PCR、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆、文庫構(gòu)建等。
本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。
試劑盒組成
組分 | Col-D0203（50T） | 編號 |
裂解液DPD | 35 mL | Col-D0203A |
洗滌液DWA | 25 mL | Col-D0203B |
洗滌液DWB | 12 mL | Col-D0203C |
洗脫液P | 5 mL | |
DNA吸附柱 | 50套 | Col-D0203E |
備注：第一次使用前，在洗滌液DWB中加入48mL無水乙醇，并標記“√"和時間，避免重復加入。
保存條件
室溫保存一年。
自備材料
水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、無DNase和無RNase離心管、β-巰基乙醇、RNaseA（10mg/mL，或貨號QR0101）
使用方法
1. 20-100mg新鮮植物樣本經(jīng)過液氮研磨后，加入700μL裂解液DPD和14μLβ-巰基乙醇，渦旋30秒。
2. 55℃孵育1分鐘。
備注：淀粉含量高，例如馬鈴薯等直接進行步驟3。
3. 12,000rpm離心1分鐘，吸取500μL上清液。
4. （選做）加入5μL RNase A（10mg/mL），室溫靜置5-10分鐘。
5. 加入250μL無水乙醇，上下顛倒混勻。
6. 全部加入DNA吸附柱中，12,000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中廢液。
7. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DWA，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。
8. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DWB，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。
9. 重復步驟8一次。
10. 12,000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中廢液。
11. 將DNA吸附柱放入新無DNase和無RNase離心管中，加入30-50μL洗脫液P，室溫放置1分鐘。
12. 12,000rpm離心2分鐘，得到DNA溶液，-80℃保存。
注意事項
1. 經(jīng)常更換手套，防止DNA污染。
2. 使用無DNase無RNase的吸頭和離心管，防止DNA降解。
3. 常更換吸頭，防止交叉污染。
4. 動作輕柔，防止基因組DNA斷裂。
5. 為了提高洗脫效率，可提前將洗脫液P置于65℃水浴后再使用。
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