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血液DNA核酸免提取试剂盒

试剂盒应用

本试剂盒能够1分钟内裂解，10分钟内提取纯化小量新鲜全血、抗凝血、血凝块基因组DNA。使用高效硅基DNA纯化柱，高效结合基因组DNA，从而获得纯度高，产量高的基因组。提取DNA可用于PCR、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆、文库构建等。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。

试剂盒组成

备注：1、第一次使用前，在洗涤液DBW2中加入48mL无水乙醇，并标记“√"和时间，避免重复加入。

保存条件

室温保存一年。

自备材料

水浴锅或金属浴、无水乙醇、无DNase无RNase离心管、RNaseA（10mg/mL，或货号QR0101）、蛋白酶K（20mg/mL，或货号QR0103）

使用方法

1. 300μL血液（不足300μL，无菌PBS补齐）中加入500μL裂解液DB，55℃孵育1分钟。

（选做）加入5μL RNase A（10mg/mL），室温静置5-10分钟。

2. 加入10μL蛋白酶K，颠倒混匀，55℃孵育2分钟。

备注：如果DNA提取量比较低，可延长孵育时间到10分钟。

3. 12,000rpm离心30秒。

4. 取750μL上清加入375μL无水乙醇，颠倒混匀。

5. 全部加到DNA吸附柱中（需要离心两次），12,000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液。

6. 向DNA吸附柱中加入500μL洗涤液DBW1，12,000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液。

7. 向DNA吸附柱中加入500μL洗涤液DBW2，12,000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液。

8. 重复步骤7一次。

9. 12,000rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。

10. 将DNA吸附柱放入新无DNase无RNase离心管中，加入30-50μL洗脱液DB，室温放置1分钟。

11. 12,000rpm离心2分钟，得到DNA溶液，-80℃保存。

注意事项

1、经常更换手套，防止DNA污染。

2、使用无DNase无RNase的吸头和离心管，防止DNA降解。

3、常更换吸头，防止交叉污染。

4、动作轻柔，防止基因组DNA断裂。

5、为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液DB置于65℃水浴后再使用。