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玉米赤霉烯酮偶聯(lián)抗原(*抗原、酶標(biāo)抗原)合成方法技術(shù)

閱讀:1381      發(fā)布時(shí)間:2014-4-9
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    玉米赤霉烯酮毒素屬于類雌激素物質(zhì),靶器官為動(dòng)物的生殖器官。毒素能引起豬只雌激素亢進(jìn)癥,使豬的生殖器官機(jī)能和形態(tài)發(fā)生變化,導(dǎo)致小母豬乳房腫大、乳腺過(guò)早成熟、陰道及陰戶紅腫、陰門外翻、陰道脫出等,呈現(xiàn)霉菌性炎癥反應(yīng)。種公豬睪丸萎縮、性欲下降、精子無(wú)活力等。目前,玉米赤霉烯酮的酶聯(lián)免疫法,免疫膠體金法等檢測(cè)方法均需要玉米赤霉烯酮抗原抗體。
(1)玉米赤霉烯酮半抗原合成(合成技術(shù)路線見(jiàn)下圖)
10-20mg玉米赤霉烯酮溶于丙酮中,在堿性溶液中與氯yi酸鈉反應(yīng),形成含有乙酸基團(tuán)的玉米赤霉烯酮半抗原。
(2)玉米赤霉烯酮全抗原人工抗原、*抗原酶標(biāo)抗原)合成
玉米赤霉烯酮半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到免疫抗原。
玉米赤霉烯酮半抗原用EDC活化,后將100mg蛋白加入0.01mpbs,溶解后與玉米赤霉烯酮半抗原偶聯(lián), 室溫?cái)嚢?h,用0.01mol/LPBS透析3天,每天換3次透析液,得到玉米赤霉烯酮與牛血清白蛋白的免疫抗原。

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