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嘔吐毒素偶聯(lián)抗原(*抗原、酶標(biāo)抗原)合成方法技術(shù)

閱讀:1704      發(fā)布時間:2014-4-9
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    嘔吐毒素其產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬(Fusarium)的菌侏,其主要污染玉米、小麥、大米、大麥、小米和燕麥等谷物,目前,嘔吐毒素的酶聯(lián)免疫法,免疫膠體金法等檢測方法均需要嘔吐毒素抗原抗體。
(1)嘔吐毒素半抗原合成(合成技術(shù)路線見下圖)
 20-100mg嘔吐毒素,與1-3mol馬來酸酐,在2-5ml甲苯中,于80℃攪拌反應(yīng),8-20h后,蒸干溶劑,酸化,萃取,重結(jié)晶后得到嘔吐毒素半抗原。
(2)嘔吐毒素全抗原(人工抗原、*抗原、酶標(biāo)抗原)合成
嘔吐毒素半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到免疫原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中,加入12.5mgEDC,加入1mlDMF溶解的10mg嘔吐毒素半抗原,室溫?cái)嚢?h,再加6mg EDC,暗處攪拌反應(yīng)并過一晚上,用0.01mol/LPBS透析3天,每天換3次透析液,得到嘔吐毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。

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