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T2 毒素免疫親和柱的操作程序是什么?

閱讀:1939      發(fā)布時間:2021-8-20
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  T2毒素(T2)是由多種鐮刀菌產(chǎn)生的一種霉菌毒素。主要污染小麥、大麥、玉米等糧食作物及其制品,對人類健康及畜牧業(yè)構成了較大危害。T-2毒素主要影響血液,肝臟,腎臟,胰腺肌肉及淋巴細胞的功能,T-2毒素中毒后的一般臨床癥狀為厭食、嘔吐、腹瀉、生長停滯、繁殖和神經(jīng)機能障礙等。T2 毒素免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的T2毒素,從而對T2毒素樣品起到非常針對性的純化作用,過柱凈化后的樣品液可直接用于液相進行T2毒素含量的檢測。親和柱與HPLC配合使用可達到快速測定的目的,以改善信噪比,可提高檢測方法的準確度。
 
  T2 毒素免疫親和柱測定的基礎是抗原抗體反應,抗體連接在柱體內(nèi),樣品經(jīng)過離心、脫脂后,緩慢的通過免疫親和柱,在免疫親和柱內(nèi)毒素與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他無關物質(zhì)。用甲醇洗脫T2毒素,然后注入到分析儀器中用于檢測。
 
  T2 毒素免疫親和柱的操作程序:
 
  1.取出免疫親和層析柱,將上方塞子取出斜剪斷,再插回親和柱上;
 
  2.將柱子與泵流操作架上的玻璃針筒連接固定,處理后的溶液上樣;
 
  3.去掉親和柱下方堵頭,調(diào)節(jié)開關,使液體以1d/s的速度流出;
 
  4.待液體排干后,更換新玻璃針筒,用10mL水溶液洗滌2次,流速2d/s;
 
  5.待液體排干后,更換新玻璃針筒,上樣1mL甲醇,用樣品瓶/玻璃試管接洗脫液,流速1d/s;
 
  5.洗脫后液體可用于檢測。

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