前言

      無論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤，一旦生長直徑超過1~2 mm，都會有血管生成。這是由于腫瘤細胞自身可分泌多種生長因子，誘導血管生成。多數(shù)惡性腫瘤的血管生成密集且生長迅速。因此，血管生成在腫瘤的發(fā)展轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用，抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發(fā)展和擴散轉(zhuǎn)移。于是體外的血管生成實驗就能很好的模擬腫瘤的血管發(fā)生過程，并且適合研究藥物對這一過程的影響實驗。本實驗以HUVEC細胞為例，介紹這一實驗的詳細過程。

    圖1   培養(yǎng)皿底部帶計數(shù)格坐標

圖2   培養(yǎng)皿底部計數(shù)格的示意圖

步驟：找到感興趣的細胞后，記下細胞的坐標信息（橫坐標是字母，縱坐標是數(shù)字），下次再觀察時，根據(jù)坐標信息找到細胞的位置，即可繼續(xù)觀察同一個細胞。

拓展應用：

1.底部的計數(shù)格可直接用于細胞計數(shù)，計數(shù)細胞無需轉(zhuǎn)移到計數(shù)板了；

圖3  邊長500微米的計數(shù)格

圖4  邊長50微米的計數(shù)格

2.鎖定感興趣的細胞，直接在培養(yǎng)皿里做免疫熒光實驗

圖5   小鼠免疫熒光染色效果（使用ibidi 35毫米培養(yǎng)皿的實驗效果）

如何選擇不同規(guī)格的計數(shù)格培養(yǎng)皿／載玻片？
根據(jù)實驗目的來！

＊指倒置熒光顯微鏡，共聚焦顯微鏡等顯微鏡
＊＊使用玻璃底的產(chǎn)品還可以有配套的蓋子進行DIC活細胞成像