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高效液相色譜法助力乳品中骨橋蛋白測定
閱讀：1285 發(fā)布時間：2022-12-22骨橋蛋白是一種高度磷酸化的酸性糖蛋白，具有較強的鈣結(jié)合特性。初步研究表明，骨橋蛋白可影響嬰兒免疫功能的發(fā)育，促進免疫系統(tǒng)的成熟并有效預(yù)防病原性感染。此外骨橋蛋白還被認(rèn)為在大腦發(fā)育中起作用，通過促進髓鞘形成在嬰兒的大腦發(fā)育和行為發(fā)展中發(fā)揮重要作用。
乳清骨橋蛋白在母乳中的含量很高，而在牛乳中的含量很少。現(xiàn)代乳基嬰幼兒配方食品通常以牛乳為原料，添加骨橋蛋白可以使配方奶粉具有更接近母乳的功能，更符合嬰幼兒的營養(yǎng)需求。
現(xiàn)代父母對于嬰幼兒食品的要求不僅是質(zhì)量安全，還有對嬰幼兒成長發(fā)育的有益影響。因此，強化骨橋蛋白的乳基嬰幼兒配方食品更受市場歡迎。隨之而來的是嬰幼兒食品和乳品骨橋蛋白含量的檢測需求。
目前測定骨橋蛋白的方法多為酶聯(lián)免疫法(ELISA)。ELISA作為酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用的技術(shù)，有操作簡單、特異性和敏感性高等優(yōu)勢。但目前的ELISA試劑盒主要針對人乳骨橋蛋白的測定，而對于牛乳骨橋蛋白開發(fā)的產(chǎn)品較少，準(zhǔn)確度和靈敏度也無法滿足要求。而且不同的商業(yè)化ELISA 試劑盒測定的濃度存在差異，這也影響到ELISA在實驗室中的應(yīng)用。
此外，無膠篩分毛細(xì)管電泳法(NGSCE)、反相高效液相色譜法(RP-HPLC)和液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)等，也都存在諸多問題。如反相液相色譜法具有良好的線性、靈敏度、精密度以及回收率，能夠簡單、快速、準(zhǔn)確的測定嬰幼兒配方奶粉中的OPN，但這種方法可能會受到其它各種蛋白質(zhì)的干擾。液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)可以提供更大的特異性、速度和分析物范圍，但是成本高，而且產(chǎn)品加工過程中的美拉德反應(yīng)使得賴氨酸乳糖化修飾、胰酶作用位點失去特異性，導(dǎo)致特異肽段減少，會對質(zhì)譜檢測結(jié)果造成較大干擾，使檢測出的骨橋蛋白含量偏低。
為解決乳品中骨橋蛋白的檢測問題，黑龍江飛鶴乳品有限公司、國家奶業(yè)科技創(chuàng)新聯(lián)盟、中優(yōu)乳奶業(yè)研究院(天津)有限公司、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所共同創(chuàng)建了創(chuàng)建了高效液相色譜測定方法，并制定團體標(biāo)準(zhǔn)《嬰幼兒食品和乳品中骨橋蛋白的測定 高效液相色譜法》。該標(biāo)準(zhǔn)于近日通過審定。
高效液相色譜法選用陰離子交換色譜柱作為分離柱，解決了不同乳制品及嬰幼兒配方乳粉前處理過程中骨橋蛋白的分離和提取難題。不僅操作簡單、成本低、普及性高，還能夠解決目前使用泛的ELISA缺少滿足要求的牛乳骨橋蛋白測定試劑盒的問題。
骨橋蛋白測定方法的改進一方面可以為配方奶粉生產(chǎn)企業(yè)提供更有力的產(chǎn)品工藝研究工具，另一方面也為市場上的強化骨橋蛋白嬰幼兒配方食品的質(zhì)量提供了保障。
(資料來源：《中國食品報》等)